ORDIN
Nr. 311 din 22 martie 2004
privind stabilirea specificatiilor tehnice comune pentru dispozitivele medicale
pentru diagnostic in vitro
ACT EMIS DE: MINISTERUL SANATATII
ACT PUBLICAT IN: MONITORUL OFICIAL NR. 413 din 10 mai 2004
Avand in vedere prevederile art. 11 alin. (5) din Hotararea Guvernului nr.
798/2003 privind stabilirea conditiilor de introducere pe piata si de utilizare
a dispozitivelor medicale pentru diagnostic in vitro,
vazand Referatul de aprobare al Directiei generale farmaceutice, inspectia
de farmacie si aparatura medicala nr. OB 3.199/2004,
in temeiul Hotararii Guvernului nr. 743/2003 privind organizarea si
functionarea Ministerului Sanatatii, cu modificarile ulterioare,
ministrul sanatatii emite urmatorul ordin:
Art. 1
Specificatiile tehnice prevazute in anexa la prezentul ordin se adopta ca
specificatii tehnice comune pentru dispozitivele medicale pentru diagnostic in
vitro cuprinse in lista A din anexa nr. 2 la Hotararea Guvernului nr. 798/2003
privind stabilirea conditiilor de introducere pe piata si de utilizare a
dispozitivelor medicale pentru diagnostic in vitro.
Art. 2
Prezentul ordin transpune Decizia Comisiei Europene 2002/364/EC din 7 mai
2002 privind specificatiile tehnice comune pentru dispozitivele medicale pentru
diagnostic in vitro.
Art. 3
Prezentul ordin va fi publicat in Monitorul Oficial al Romaniei, Partea I.
Ministrul sanatatii,
Ovidiu Brinzan
ANEXA 1
SPECIFICATII TEHNICE COMUNE (STC)
pentru dispozitivele medicale pentru diagnostic in vitro
1. Domeniu
Prezentele specificatii tehnice comune, denumite in continuare STC, sunt
stabilite pentru dispozitivele medicale la care se face referire in lista A din
anexa nr. 2 la Hotararea Guvernului nr. 798/2003 privind stabilirea conditiilor
de introducere pe piata si de utilizare a dispozitivelor medicale pentru
diagnostic in vitro:
a) reactivi si produsi de reactie, inclusiv calibratori si materiale de
control, pentru determinarea urmatoarelor grupe de sange: sistemul AB0, Rhesus
(C, c, D, E, e), anti-Kell;
b) reactivi si produsi de reactie, inclusiv calibratori si materiale de
control, pentru detectarea, confirmarea si cuantificarea in probele prelevate
din organismul uman a markerilor infectiei cu HIV (HIV 1 si 2), HTLV I si II si
cu virus hepatic B, C si D.
2. Definitii
Sensibilitate (de diagnostic) - probabilitatea ca dispozitivul sa ofere un
rezultat pozitiv in prezenta markerului de cercetat.
Real pozitiv - proba cunoscuta a fi pozitiva pentru markerul de cercetat si
clasificata corect de catre dispozitiv.
Fals negativ - proba cunoscuta a fi pozitiva pentru markerul de cercetat si
clasificata incorect de catre dispozitiv.
Specificitate (de diagnostic) - probabilitatea ca dispozitivul sa ofere un
rezultat negativ in absenta markerului de cercetat.
Fals pozitiv - proba cunoscuta a fi negativa pentru markerul de cercetat si
clasificata incorect de catre dispozitiv.
Real negativ - proba cunoscuta a fi negativa pentru markerul de cercetat si
clasificata corect de catre dispozitiv.
Sensibilitate analitica - in contextul STC poate fi exprimata ca limita de
detectare, adica cea mai redusa cantitate a markerului de cercetat care poate
fi detectata cu precizie.
Specificitate analitica - capacitatea unei metode de a determina numai
markerul de cercetat.
Tehnici de amplificare a acizilor nucleici (NAT) - in acest context
termenul NAT este utilizat pentru teste care detecteaza si/sau cuantifica
acizii nucleici fie prin amplificarea unei secvente tinta, fie prin
amplificarea unui semnal, fie prin hibridizare.
Test rapid - se refera la teste ce pot fi utilizate doar singure sau in
serii mici si care au fost proiectate sa ofere un rezultat rapid pentru
testarea in vecinatatea pacientului.
Robustete - robustetea unei proceduri analitice este masura capacitatii
sale a a ramane neafectata de variatii mici, dar intentionate, ale parametrilor
metodei si furnizeaza o indicatie asupra fiabilitatii sale in timpul utilizarii
normale.
Rata de eroare a intregului sistem este data de frecventa erorilor atunci
cand intregul proces este realizat conform recomandarilor producatorului.
3. STC pentru produsele definite in lista A din anexa nr. 2 la Hotararea
Guvernului nr. 798/2003
3.1. STC pentru evaluarea performantei reactivilor si produsilor de reactie
pentru detectarea, confirmarea si cuantificarea in probele prelevate din
organismul uman a markerilor infectiei cu HIV (HIV 1 si 2), HTLV I si II si cu
virus hepatic B, C si D
Principii generale
3.1.1. Dispozitivele ce detecteaza infectii virale, introduse pe piata
pentru a fi utilizate ca teste de screening si/sau ca teste de diagnostic,
trebuie sa indeplineasca cerintele de sensibilitate si specificitate din
tabelul 1.
3.1.2. Dispozitivele destinate de catre producator pentru testarea
fluidelor biologice, altele decat ser sau plasma, de exemplu: urina, saliva
etc., trebuie sa indeplineasca aceleasi cerinte de sensibilitate si
specificitate ale STC ca si testele pentru ser sau plasma. Evaluarea
performantei se va face prin testarea probelor de la aceiasi indivizi, atat
prin testele supuse aprobarii, cat si prin teste recunoscute pentru
respectivele determinari serice sau plasmatice.
3.1.3. Dispozitivele destinate de catre producator pentru autotestare,
adica pentru utilizare la domiciliu, trebuie sa indeplineasca aceleasi cerinte STC
de sensibilitate si specificitate ca si dispozitivele corespunzatoare destinate
uzului profesional. Pentru a valida functionarea dispozitivului si
instructiunile de utilizare, parti relevante din evaluarea performantei trebuie
efectuate (sau repetate) de catre utilizatori neprofesionisti adecvati.
3.1.4. Toate evaluarile de performanta trebuie efectuate prin comparatie
directa cu un dispozitiv etalon cu o performanta acceptabila. O data instituit
marcajul CE al dispozitivelor medicale pentru diagnostic in vitro, dispozitivul
utilizat pentru comparatie trebuie sa poarte marcajul CE, daca se afla pe piata
la momentul evaluarii performantei.
3.1.5. Daca se identifica discrepante in rezultatele testelor, ca parte a
unei evaluari, aceste rezultate discrepante trebuie solutionate, pe cat
posibil, astfel:
a) prin evaluarea probei cu discrepante in alte sisteme de testare;
b) prin utilizarea unei metode alternative sau a unui marker alternativ;
c) printr-o revizuire a starii clinice si a diagnosticului pacientului; si
d) prin testarea unor probe in dinamica.
3.1.6. Evaluarile de performanta trebuie realizate pe o populatie
echivalenta cu populatia europeana.
3.1.7. Probele pozitive utilizate in evaluarea performantei trebuie selectate
astfel incat sa reflecte stadii diferite ale maladiei/maladiilor in cauza,
modele diferite de anticorpi, genotipuri diferite, subtipuri diferite etc.
3.1.8. Pentru dispozitivele de screening al sangelui (cu exceptia testelor
pentru HBsAg) toate probele real pozitive trebuie identificate ca pozitive de
catre dispozitivul care va primi marcajul CE (tabelul 1). In cazul testelor
pentru HBsAg noul dispozitiv trebuie sa prezinte o performanta globala cel
putin echivalenta cu cea a dispozitivului cunoscut (pct. 3.1.4). Sensibilitatea
de diagnostic a testului in perioada de infectie precoce (seroconversie)
trebuie sa reprezinte cel mai bun nivel actual de dezvoltare a tehnologiei in
domeniu. Daca testari ulterioare ale acelorasi sau ale unor paneluri aditionale
de seroconversie sunt realizate de catre organismul notificat sau de catre
producator, rezultatele trebuie sa confirme datele initiale ale evaluarii de
performanta (tabelul 1).
3.1.9. Probele negative utilizate intr-o evaluare de performanta trebuie
definite astfel incat sa reflecte populatia tinta pentru care este destinat
testul, de exemplu donatori de sange, pacienti spitalizati, gravide etc.
3.1.10. La evaluarile de performanta pentru teste de screening (tabelul 1)
trebuie sa fie investigate populatiile de donatori de sange din cel putin doua
centre de donare de sange si sa fie reprezentate de donari de sange
consecutive, ce nu au fost selectate astfel incat sa excluda donatorii aflati
la prima prezentare.
3.1.11. Dispozitivele trebuie sa aiba o specificitate de cel putin 99,5%
pentru donarile de sange, daca nu se specifica altfel in tabelele insotitoare.
Specificitatea trebuie calculata utilizandu-se frecventa rezultatelor repetat
reactive (adica fals pozitive) la donatorii de sange negativi pentru markerul
de cercetat.
3.1.12. Dispozitivele trebuie evaluate pentru a se stabili efectul
potential al interferarii unor substante, ca parte a evaluarii de performanta.
Substantele posibil interferente ce trebuie evaluate depind intr-o anumita
masura de compozitia reactivilor si de configuratia testului. Substantele
potential interferente trebuie identificate ca parte a analizei de risc
necesare datorita cerintelor esentiale pentru fiecare dispozitiv nou, dar pot
include, de exemplu:
a) probe reprezentand infectii "inrudite";
b) probe de la multipare, adica femei care au avut mai mult de o sarcina,
sau de la pacienti pozitivi pentru factor reumatoid;
c) pentru antigene recombinante, anticorpi umani fata de componente ale
sistemului de expresie, de exemplu, anti-E. Coli sau anti-levuri.
3.1.13. In cazul dispozitivelor destinate de catre producator pentru a fi
utilizate cu ser si plasma, evaluarea performantei trebuie sa demonstreze
echivalenta serului cu plasma. Aceasta trebuie demonstrata pentru cel putin 50
de donari.
3.1.14. Pentru dispozitivele destinate utilizarii cu proba de plasma,
evaluarea performantei trebuie sa verifice performanta dispozitivului utilizand
toate anticoagulantele pe care producatorul le-a indicat pentru utilizare
impreuna cu dispozitivul. Aceasta trebuie demonstrata pentru cel putin 50 de
donari.
3.1.15. Ca parte a analizei de risc cerute, rata de eroare a intregului
sistem, care conduce la rezultate fals negative, trebuie determinata prin
testari repetate pe probe slab pozitive.
3.2. Cerinte aditionale pentru tehnicile de amplificare a acizilor nucleici
(NAT)
Criteriile pentru evaluarea performantei pentru testele NAT pot fi gasite
in tabelul 2.
3.2.1. Pentru testele de amplificare a secventelor tinta, un control de
functionalitate pentru fiecare proba testata (control intern) trebuie sa
reflecte cel mai inalt nivel al tehnologiei in domeniu. Acest control trebuie
pe cat posibil sa fie facut pe parcursul intregului proces, adica extractie,
amplificare/hibridizare, detectare.
3.2.2. Sensibilitatea analitica sau limita de detectare pentru testele NAT
trebuie exprimata prin valoarea cut-off pozitiva de 95% . Aceasta reprezinta
concentratia analitului cand 95% dintre teste dau rezultate pozitive in urma
dilutiilor seriate ale unui material de referinta international, de exemplu un
standard OMS sau materiale de referinta calibrate.
3.2.3. Detectarea genotipului trebuie demonstrata prin validarea adecvata a
proiectului sondei sau a primerului si trebuie, de asemenea, validata prin
testarea unor probe al caror genotip este caracterizat.
3.2.4. Rezultatele testelor NAT cantitative trebuie sa fie trasabile la
standardele internationale sau la materialele de referinta calibrate, daca acestea
sunt disponibile, si sa fie exprimate in unitati internationale utilizate in
domeniul specific al aplicatiei.
3.2.5. Testele NAT pot fi utilizate pentru detectarea virusurilor in probe
negative pentru anticorpi, adica probele in faza de preseroconversie.
Virusurile inglobate in complexe imune se pot comporta diferit in comparatie cu
virusurile libere, de exemplu in cursul etapei de centrifugare. Prin urmare,
este important ca in cursul testelor pentru robustete sa fie incluse probe
negative pentru anticorpi (in faza de preseroconversie).
3.2.6. Pentru investigarea unui potential transfer interprobe trebuie
realizate cel putin 5 reprize cu probe alternativ inalt pozitive si negative in
timpul studiilor pentru robustetea testului. Probele inalt pozitive trebuie sa
cuprinda probe cu titruri inalte de virus aparute in mod natural.
3.2.7. Rata de eroare a intregului sistem, conducand la rezultate fals
negative, trebuie determinata prin testarea de probe slab pozitive. Probele
slab pozitive trebuie sa contina o concentratie de virus echivalenta cu de 3
ori concentratia de virus cut-off pozitiva pentru 95% .
3.3. STC pentru testarile la lansarea de catre producator a reactivilor si
produsilor de reactie pentru detectarea, confirmarea si cuantificarea in
probele prelevate din organismul uman a markerilor infectiei cu HIV (HIV 1 si
2), HTLV I si II si cu virus hepatic B, C, D (numai teste imunologice)
3.3.1. Criteriile pentru testarile la lansarea de catre producator trebuie
sa asigure ca fiecare lot identifica corect antigenele, epitopii si anticorpii
relevanti.
3.3.2. Testarile la lansarea de catre producator a lotului trebuie sa
includa cel putin 100 de probe negative pentru analitul in cauza.
3.4. STC pentru evaluarea performantei reactivilor si a produsilor de
reactie pentru determinarea antigenelor de grup sanguin: sistemul AB0 (A, B),
Rhesus (C, c, D, E, e) si Kell (K)
Criteriile pentru evaluarea performantei reactivilor si a produsilor de
reactie pentru determinarea antigenelor de grup sanguin: sistemul AB0 (A, B),
Rhesus (C, c, D, E, e) si Kell (K) pot fi gasite in tabelul 9.
3.4.1. Toate evaluarile de performanta trebuie realizate in comparatie
directa cu un dispozitiv cunoscut cu o performanta acceptabila. O data
instituit marcajul CE al dispozitivului pentru diagnostic in vitro,
dispozitivul utilizat pentru comparatie trebuie sa poarte marcajul CE, daca se
afla pe piata la momentul evaluarii de performanta.
3.4.2. Daca se identifica discrepante in rezultatele testelor, ca parte a
unei evaluari, acestea trebuie rezolvate, pe cat posibil, astfel:
a) prin evaluarea probei cu discrepante in alte sisteme de testare;
b) prin utilizarea unei metode alternative.
3.4.3. Evaluarile de performanta trebuie realizate pe o populatie
echivalenta cu populatia europeana.
3.4.4. Probele pozitive utilizate in evaluarea performantei trebuie
selectionate astfel incat sa reflecte expresii antigenice variabile sau slabe.
3.4.5. Dispozitivele trebuie evaluate pentru a se stabili efectul
interferarii potentiale a unor substante, ca parte a evaluarii de performanta.
Substantele posibil interferente ce trebuie evaluate depind intr-o anumita
masura de compozitia reactivilor si de configuratia testului. Substantele
potential interferente trebuie identificate ca parte a analizei de risc
necesare datorita cerintelor esentiale pentru fiecare dispozitiv nou.
3.4.6. Pentru dispozitive destinate utilizarii cu plasma, evaluarea
performantei trebuie sa verifice performanta dispozitivului utilizand toate
anticoagulantele pe care producatorul le-a indicat pentru utilizare impreuna cu
dispozitivul. Aceasta trebuie demonstrata pentru cel putin 50 de donari.
3.5. STC pentru testarile la lansarea de catre producator pentru reactivi
si produsi de reactie pentru determinarea antigenelor de grup sanguin: sistemul
AB0 (A, B), Rhesus (C, c, D, E, e) si Kell
3.5.1. Criteriile pentru testarile la lansarea de catre producator trebuie
sa asigure ca fiecare lot identifica corect antigenele, epitopii si anticorpii
relevanti.
3.5.2. Cerintele pentru testarile la lansarea de catre producator sunt
prezentate in tabelul 10.
Tabelul 1: Teste de screening: anti-HIV 1 si 2, anti-HTLV I si II,
anti-HCV, HBsAg, anti-HBc*)
*) Tabelul 1 este reprodus in facsimil.
______________________________________________________________________________
| Sensibilitate de diagnostic
|
|______________________________________________________________________________|
| |Anti-HIV 1/2| Anti-HTLV | Anti-HCV | HBsAg | Anti-HBc
|
| | | I/II | | |
|
|______________|____________|___________|_____________|____________|___________|
|Specimene |400 HIV 1 |300 HTLV I |400 inclusiv |400 inclusiv|400
|
|pozitive |100 HIV 2 |100 HTLV II|genotipurile |considerarea|inclusiv
|
| |inclusiv 40 | |la - 4 a: |subtipurilor|evaluarea
|
| |subtipuri | |minim 20 de | |altor
|
| |non-B, toate| |probe/genotip| |markeri
HBV|
| |subtipurile | |genotipuri | |
|
| |HIV 1 | |4 non-a si 5:| |
|
| |disponibile | |minim 10 | |
|
| |trebuie | |probe/genotip| |
|
| |reprezentate| | | |
|
| |de cel putin| | | |
|
| |trei probe | | | |
|
| |pentru | | | |
|
| |fiecare | | | |
|
| |subtip | | | |
|
|______________|____________|___________|_____________|____________|___________|
|Paneluri de |20 de |Urmeaza a |20 de |20 de |Urmeaza a
|
|sero-conversie|paneluri |fi definite|paneluri |paneluri |fi
definita|
| |10 alte |cand vor fi|10 alte |10 alte |cand vor
fi|
| |paneluri (la|disponibile|paneluri (la |paneluri
(la|disponibile|
| |Organismul | |Organismul |Organismul |
|
| |Notificat | |Notificat |Notificat |
|
| |ori la | |ori la |ori la |
|
| |producator) | |producator) |producator) |
|
|______________|____________|___________|_____________|____________|___________|
| Sensibilitate analitica |
|______________________________________________________________________________|
|Standarde | | | |0,5 ng/ml |
|
| | | | |(standarde |
|
| | | | |franceze sau|
|
| | | | |engleze pana|
|
| | | | |cand cele |
|
| | | | |elaborate de|
|
| | | | |OMS vor fi |
|
| | | | |disponibile)|
|
|______________|____________|___________|_____________|____________|___________|
| Specificitate
|
|______________________________________________________________________________|
|Donatori | 5.000 | 5.000 | 5.000 | 5.000 | 5.000
|
|neselectati | | | | |
|
|(inclusiv cei | | | | |
|
|care doneaza | | | | |
|
|prima data) | | | | |
|
|______________|____________|___________|_____________|____________|___________|
|Pacienti | 200 | 200 | 200 | 200 | 200
|
|spitalizati | | | | |
|
|______________|____________|___________|_____________|____________|___________|
|Specimene de | 100 | 100 | 100 | 100 | 100
|
|sange cu | | | | |
|
|potential de | | | | |
|
|reactii | | | | |
|
|incrucisate | | | | |
|
|(RF+, virusuri| | | | |
|
|inrudite, | | | | |
|
|gravide etc.) | | | | |
|
|______________|____________|___________|_____________|____________|___________|
Tabelul 2: Teste NAT pentru HIV 1, HCV, HBV, HTLV I/II (calitative si cantitative;
nu tipare moleculare)*)
*) Tabelul 2 este reprodus in facsimil.
______________________________________________________________________________
| HIV 1 | HCV
|
|___________________________________________________|__________________________|
| NAT | calitativ | cantitativ | calitativ |
cantitativ|
| | | |
|___________|
| | | | |Ca pentru
|
| | | | |evaluarea
|
| | | |
|cantitativa|
| | | | | HIV
|
|_______________|_______________|___________________|______________|___________|
|Sensibilitate |In acord cu |Limita de detectie:|In acord cu |
|
|Limita de |principiile de |la fel ca pentru |principiile de|
|
|detectie |validare |testele calitative;|validare |
|
|Detectia |EP*1): mai |Limita de |EP*1): mai |
|
|sensibilitatii |multe serii de |cuantificare: |multe serii de|
|
|analitice |dilutie intr-o |dilutii (jumatate |dilutii intr-o|
|
|(UI/ml; |concentratie |din log 10 sau mai |concentratie |
|
|definita prin |limita. Analiza|putin) ale |limita; | |
|standardele OMS|statistica (de |preparatelor de |analiza |
|
|sau prin |ex. analiza |referinta |statistica (de|
|
|materiale de |Probit) pe baza|calibrate, |ex. analiza |
|
|referinta |a cel putin 24 |definitia pentru |Probit) pe |
|
|calibrate) |de replicari; |limita de |baza a cel |
|
| |calculul |cuantificare |putin 24 de |
|
| |valorii cut-off|inferioara, cea |replicari; |
|
| |de 95% |superioara, |calculul |
|
| | |precizia, |valorii |
|
| | |acuratetea, |cut-off de 95%|
|
| | |"linear", |
| |
| | |"intervalul de |
| |
| | |masurare", |
| |
| | |"intervalul |
| |
| | |dinamic" |
| |
| | |Reproductibilitatea| |
|
| | |la diferite nivele | |
|
| | |de concentratie | |
|
| | |trebuie | | |
| | |evidentiata | |
|
|_______________|_______________|___________________|______________|___________|
|Eficienta |Cel putin 10 |Serii de dilutii |Cel putin 10 |
|
|detectiei/ |probe per |ale tuturor |probe per |
|
|cuantificarii |subtip (daca |genotipurilor/ |genotip (daca |
|
|genotipurilor/ |sunt |subtipurilor |sunt |
|
|subtipurilor |disponibile) |relevante, |disponibile) |
|
| |Supernatante |preferabil din | |
|
| |din culturi |materiale de | |
|
| |celulare (pot |referinta, daca | |
|
| |substitui |sunt disponibile | |
|
| |subtipurile |Transcriptii sau | |
|
| |rare de HIV 1) |plasmide | |
|
| | |cuantificate prin | |
|
| | |metode adecvate pot| |
|
| | |fi utilizate | |
|
| | | | |
|
| |In acord cu | |In acord cu |
|
| |principiile de | |principiile de| |
| |validare EP*1) | |validare EP*1)|
|
| |daca sunt | |daca sunt |
|
| |disponibile | |disponibile |
|
| |materiale de | |materiale de |
|
| |referinta | |referinta |
|
| |calibrate | |calibrate |
|
| |pentru | |pentru |
|
| |subtipuri; | |subtipuri; |
|
| |transcriptiile | |transcriptiile|
|
| |in vitro pot fi| |in vitro pot |
|
| |o optiune | |fi o optiune |
|
|_______________|_______________|___________________|______________|___________|
|Specificitate |500 de donatori|100 de donatori de |500 de |
|
|de diagnostic |de sange |sange |donatori de |
|
|probe negative | | |sange |
|
|_______________|_______________|___________________|______________|___________|
|Markeri cu |Prin evidenta |Ca pentru teste |Prin |
|
|potentiala |proiectarii |calitative |proiectarea |
|
|reactie |adecvate a | |testelor si/ | |
|incrucisata |testului | |sau testarea a|
|
| |(compararea | |minim 10 probe|
|
| |secventei de | |pozitive |
|
| |ex.) si/sau | |pentru |
|
| |testarea a | |flavivirusuri |
|
| |minim 10 probe | |umane (de ex. |
|
| |pozitive pentru| |HGV, YFV) |
|
| |retrovirusuri | | |
|
| |umane (de ex. | | |
|
| |HTLV) | | |
|
|_______________|_______________|___________________|______________|___________|
|Robustete | |Ca pentru teste | |
|
| | |calitative | |
|
|_______________|_______________|___________________|______________|___________|
|Contaminare |Minim 5 serii | |Minim 5 serii |
|
|incrucisata |folosind | |folosind |
|
| |alternativ | |alternativ |
|
| |probe inalt | |probe inalt |
|
| |pozitive | |pozitive |
|
| |(cunoscute ca | |(cunoscute ca |
|
| |se produc | |se produc |
|
| |natural) si | |natural) si |
|
| |probe negative | |probe negative|
|
|_______________|_______________|___________________|______________|___________|
|Inhibare |Controlul | |Controlul |
|
| |intern e de | |intern e de |
|
| |preferat sa | |preferat sa |
|
| |parcurga | |parcurga |
|
| |intreaga | |intreaga |
|
| |procedura NAT | |procedura NAT |
|
|_______________|_______________|___________________|______________|___________|
|Rata de eroare |Minim 100 de | |Minim 100 de |
|
|a intregului |probe virus- | |probe virus- |
|
|sistem care |spiked cu 3 x | |spiked cu 3 x |
|
|conduce la |concentratia de| |concentratia |
|
|rezultate |cut-off 95% | |de cut-off 95%|
|
|fals negative |pozitiva | |pozitiva |
|
|_______________|_______________|___________________|______________|___________|
- continuare -
______________________________________________________________________________
| HBV | HTLV I/II | Criterii de
|
|_______________________________|_______________________________| acceptare
|
| calitativ | cantitativ| calitativ | cantitativ|
|
| |___________| |___________|
|
| |Ca pentru | |Ca pentru | |
| |evaluarea | |evaluarea |
|
| |cantitativa| |cantitativa|
|
| | HIV | | HIV |
|
|___________________|___________|___________________|___________|______________|
|In acord cu | |In acord cu | |
|
|principiile de | |principiile de | |
|
|validare EP*1): | |validare EP*1): | |
|
|mai multe serii de | |mai multe serii de | |
|
|dilutii intr-o | |dilutii intr-o | |
|
|concentratie | |concentratie | |
|
|limita; | |limita; | |
|
|Analiza statistica | |Analiza statistica | |
|
|(de ex. analiza | |(de ex. analiza | |
|
|Probit) pe baza a | |Probit) pe baza a | |
|
|cel putin 24 de | |cel putin 24 de | |
|
|replicari; | |replicari; | |
|
|calculul valorii | |calculul valorii | |
|
|cut-off de 95% | |cut-off de 95% | |
|
|___________________|___________|___________________|___________|______________|
|Daca sunt | |Daca sunt | |
|
|disponibile | |disponibile | |
|
|materiale de | |materiale de | |
|
|referinta | |referinta | |
|
|calibrate pentru | |calibrate pentru | |
|
|genotipuri | |genotipuri | |
|
| | | | |
|
|In acord cu | |In acord cu | |
|
|principiile de | |principiile de | |
|
|validare EP*1): | |validare EP*1): | |
|
|daca sunt | |daca sunt | |
|
|disponibile | |disponibile | |
|
|materiale de | |materiale de | |
|
|referinta calibrate| |referinta calibrate| |
|
|pentru subtipuri; | |pentru subtipuri; | |
|
|transcriptiile | |transcriptiile | |
|
|in vitro pot fi o | |in vitro pot fi o | |
|
|optiune | |optiune | |
|
|___________________|___________|___________________|___________|______________|
|500 de donatori | |500 de donari de | |
|
|de sange | |sange individuale | |
|
|___________________|___________|___________________|___________|______________|
|Prin proiectarea | |Prin proiectarea | |
|
|testelor si/sau | |testelor si/sau | |
|
|testarea a minim | |testarea a minim | |
|
|10 probe pozitive | |10 probe pozitive | |
|
|pentru ADN viral | |pentru | |
|
| | |retrovirusuri | |
|
| | |umane (de ex. HIV) | |
|
|___________________|___________|___________________|___________|______________|
| | | | |
|
| | | | |
|
|___________________|___________|___________________|___________|______________|
|Minim 5 serii | |Minim 5 serii | |
|
|folosind alternativ| |folosind alternativ| |
|
|probe inalt | |probe inalt | |
|
|pozitive (cunoscute| |pozitive (cunoscute| |
|
|ca se produc | |ca se produc | |
|
|natural) si probe | |natural) si probe | |
|
|negative | |negative | |
|
|___________________|___________|___________________|___________|______________|
|Controlul intern | |Controlul intern | |
|
|e de preferat sa | |e de preferat sa | |
|
|parcurga intreaga | |parcurga intreaga | |
|
|procedura NAT | |procedura NAT | |
|
|___________________|___________|___________________|___________|______________|
|Minim 100 de probe | |Minim 100 de probe | |99/100 teste
|
|virus-spiked cu | |virus-spiked cu | |pozitive
|
|3 x concentratia de| |3 x concentratia de| |
|
|cut-off 95% | |cut-off 95% | |
|
|pozitiva | |pozitiva | |
|
|___________________|___________|___________________|___________|______________|
| *1) linii directoare din Farmacopeea Europeana
|
| |
| NOTA:
|
| Criteriile de acceptare pentru "Rata de eroare a intregului sistem
care |
| conduce la rezultate fals negative" este 99/100 teste pozitive.
|
|______________________________________________________________________________|
Tabelul 3: Teste rapide: anti-HIV 1 si 2, anti-HCV, HBsAg, anti-HBc,
anti-HTLV I si II*)
*) Tabelul 3 este reprodus in facsimil.
______________________________________________________________________________
| Sensibilitate de diagnostic
|
|______________________________________________________________________________|
| Criterii de acceptare: Aceleasi criterii ca si la testele de screening
|
|______________________________________________________________________________|
| |Anti-HIV 1/2| Anti-HCV | HBsAg | Anti-HBc | Anti-HTLV
|
| | | | | | I/II
|
|_____________|____________|____________|____________|____________|____________|
|Specimene |Aceleasi |Aceleasi |Aceleasi |Aceleasi |Aceleasi
|
|pozitive |criterii ca |criterii ca |criterii ca |criterii ca |criterii ca
|
| |si la |si la |si la |si la |si la
|
| |testele de |testele de |testele de |testele de |testele de
|
| |screening |screening |screening |screening |screening
|
|_____________|____________|____________|____________|____________|____________|
| Specificitate de diagnostic
|
|______________________________________________________________________________|
| Criterii de acceptare: >/= 99% (anti-HBc >/=
96%) |
|______________________________________________________________________________|
|Specimene |1.000 donari|1.000 donari|1.000 donari|1.000 donari|1.000
donari|
|negative |de sange |de sange |de sange |de sange |de sange
|
| | | | | |
|
| |200 |200 |200 |200 |200
|
| |specimene |specimene |specimene |specimene |specimene
|
| |clinice |clinice |clinice |clinice |clinice
|
| | | | | |
|
| |200 de probe|200 de probe|200 de probe|200 de probe|200 de
probe|
| |de la |de la |de la |de la |de la
|
| |gravide |gravide |gravide |gravide |gravide
|
| | | | | |
|
| |100 probe |100 probe |100 probe |100 probe |100 probe
|
| |potential |potential |potential |potential |potential
|
| |interferente|interferente|interferente|interferente|interferente|
|_____________|____________|____________|____________|____________|____________|
Tabel 4: Teste suplimentare/de confirmare pentru anti-HIV 1 si 2, anti-HTLV
I si II, anti-HCV, HBsAg*)
*) Tabelul 4 este reprodus in facsimil.
______________________________________________________________________________
| Sensibilitate de diagnostic
|
|______________________________________________________________________________|
| Criterii de acceptare: Identificare corecta ca pozitiv (sau neconcludent),
|
| adica nu negativ
|
|______________________________________________________________________________|
| |Test de |Test de |Test |Test de
|
| |confirmare |confirmare |suplimentar |confirmare
|
| |anti-HIV |anti-HTLV |HCV |HBsAg
|
|_______________|_______________|______________|_______________|_______________|
|Specimene |200 HIV 1 si |200 HTLV I si |300 HCV |300 HBsAg
|
|pozitive |100 HIV 2 |100 HTLV II | |
|
| | | | |
|
| |Incluzand | |Incluzand |Incluzand
|
| |probe din | |probe din |probe din
|
| |diferite faze | |diferite faze |diferite faze
|
| |ale infectiei | |ale infectiei |ale infectiei
|
| |si reflectand | |si reflectand |20 de probe
|
| |diferite modele| |diferite
modele|"inalt |
| |de anticorpi | |de anticorpi
|pozitive" |
| | | |genotipurile 1-|(> 50
ng |
| | | |4a: 15 probe; |HBsAg/ml);
|
| | | |genotipurile 4 |20 de probe in
|
| | | |(non a), 5: |zona de
cut-off|
| | | |cinci probe; |
|
| | | |sase: daca sunt|
|
| | | |disponibile |
|
|_______________|_______________|______________|_______________|_______________|
|Paneluri de |15 paneluri de | |15 paneluri de |15 paneluri de
|
|seroconversie |seroconversie/ | |seroconversie/ |seroconversie/
|
| |paneluri la | |paneluri la |paneluri la
|
| |titru scazut | |titru scazut |titru scazut
|
|_______________|_______________|______________|_______________|_______________|
| Sensibilitate analitica
|
|______________________________________________________________________________|
|Standarde | | | |Standarde
HbsAg|
| | | | |(AdM, NIBSC,
|
| | | | |OMS)
|
|_______________|_______________|______________|_______________|_______________|
| Specificitate de diagnostic
|
|______________________________________________________________________________|
| Criterii de acceptare: Fara rezultate fals pozitive/*1) fara neutralizare
|
|______________________________________________________________________________|
|Specimene |200 de donari |200 de donari |200 de donari |20 de teste
|
|negative |de sange |de sange |de sange |fals pozitive
|
| | | | |in testul de
|
| | | | |screening
|
| | | |
|corespondent*1)|
| | | | |
|
| |200 de probe |200 de probe |200 de probe |
|
| |clinice |clinice |clinice |
|
| |inclusiv |inclusiv |inclusiv |
|
| |gravide |gravide |gravide |
|
| | | | |
|
| |50 de probe |50 de probe |50 de probe |50 de probe
|
| |potential |potential |potential |potential
|
| |interferente, |interferente, |interferente, |interferente |
| |inclusiv probe |inclusiv probe|inclusiv probe |
|
| |cu rezultate |cu rezultate |cu rezultate |
|
| |neconcludente |neconcludente |neconcludente |
|
| |in alte teste |in alte teste |in alte teste |
|
| |de confirmare |de confirmare |de confirmare |
|
|_______________|_______________|______________|_______________|_______________|
| *1) Criteriile de acceptare: fara neutralizare pentru testul de confirmare
|
| pentru HBsAg
|
|______________________________________________________________________________|
Tabel 5: Antigen HIV 1*)
*) Tabelul 5 este reprodus in facsimil.
______________________________________________________________________________
| | Test antigen HIV 1 | Criterii de
|
| | | acceptare
|
|________________________________|______________________________|______________|
| Sensibilitate | Specimene | 50 HIV 1 Ag-pozitiv | Identificare
|
| de diagnostic | pozitive | 50 supernatante de culturi | corecta
|
| | | celulare incluzand diferite | (dupa
|
| | | subtipuri de HIV 1 si HIV 2 |
neutralizare)|
|
|________________|______________________________|______________|
| | Paneluri de | 20 de paneluri de |
|
| | sero-conversie | sero-conversie/paneluri la |
|
| | | titru scazut |
|
|_______________|________________|______________________________|______________|
| Specificitate | Standarde | ADM sau prima referinta | < 50
pg/ml |
| de diagnostic | | internationala |
|
|_______________|________________|______________________________|______________|
| Specificitate | | 200 de donari de sange | >/=
99,5% |
| de diagnostic | | 200 de probe clinice | dupa
|
| | | 50 probe potential | neutralizare
|
| | | interferente |
|
|_______________|________________|______________________________|______________|
Tabel 6: Test de serotipare HCV*)
*) Tabelul 6 este reprodus in facsimil.
______________________________________________________________________________
| | Test de serotipare HCV 1 | Criterii de
|
| | | acceptare
|
|________________________________|______________________________|______________|
| Sensibilitate | Specimene | 200 | >/=
95% |
| de diagnostic | pozitive | inclusiv genotipurile | acord intre
|
| | | 1 - 4a: > 20 probe. | serotipare
si|
| | | 4 (non a); | genotipare
|
| | | 5: > 10 mostre,
| |
| | | 6: daca sunt disponibile |
|
|_______________|________________|______________________________|______________|
| Specificitate | Specimene | 100 |
|
| de diagnostic | negative | |
|
|_______________|________________|______________________________|______________|
Tabel 7: Markeri HBV: anti-HBs, anti-HBc IgM, anti-HBe, HBeAg*)
*) Tabelul 7 este reprodus in facsimil.
______________________________________________________________________________
| | Anti-HBs | anti-HBc | anti-HBe| HBeAg |Criterii
|
| | | IgM | | |de
|
| | | | |
|acceptare|
|_______________________|____________|___________|_________|_________|_________|
|Sensibilitate|Specimene|100 de |200 |200 |200 | >/=
98% |
|de diagnostic|pozitive |vaccinuri |Incluzand |Incluzand|Incluzand|
|
| | |100 de |probe din |probe din|probe din|
|
| | |persoane |diferite |diferite |diferite |
|
| | |infectate |faze ale |faze ale |faze ale |
|
| | |natural |infectiei |infectiei|infectiei|
|
| | | |(acuta/ |(acuta/ |(acuta/ |
|
| | | |cronica |cronica |cronica |
|
| | | |etc.) |etc.) |etc.) |
|
|
|_________|____________|___________|_________|_________|_________|
| |Paneluri |10 |Cand vor fi| | |
|
| |de sero- |urmariri in |disponibile| | |
|
| |conversie|evolutie sau| | | |
|
| | |sero- | | | | |
| | |conversii | | | |
|
| | |anti-HBs | | | |
|
|_____________|_________|____________|___________|_________|_________|_________|
|Sensibilitate|Standarde|Standarde | |
|Standarde|Anti-HBs:|
|analitica | |ale OMS | | |ale PEI |< 10
m |
| | | | | | |UI/ml
|
|_____________|_________|____________|___________|_________|_________|_________|
|Specificitate|Specimene|500 inclusiv|200 de |200 de |200 de | >/=
98% |
|de diagnostic|negative |probe |donari de |donari |donari |
|
| | |clinice |sange |de sange |de sange |
|
| | | | | | |
|
| | | |200 de |200 de |200 de |
|
| | | |probe |probe |probe |
|
| | | |clinice |clinice |clinice |
|
| | | | | | |
|
| | |50 de |50 de |50 de |50 de |
|
| | |probe |probe |probe |probe |
|
| | |potential |potential |potential|potential|
|
| | |interferente|interfe- |interfe- |interfe- | |
| | | |rente |rente |rente |
|
|_____________|_________|____________|___________|_________|_________|_________|
Tabel 8: Markeri HDV: anti-HDV, anti-HDV IgM, Antigen Delta*)
*) Tabelul 8 este reprodus in facsimil.
______________________________________________________________________________
| | | anti-HDV | anti-HDV | Antigen |Criterii
de|
| | | | IgM | Delta |acceptare
|
|______________|__________|_____________|_____________|____________|___________|
|Sensibilitate |Specimene |100 |50 |10 | >/=
98% |
|de diagnostic |pozitive |specificand |specificand |specificand |
|
| | |markeri HBV |markeri HBV |markeri HBV |
|
|______________|__________|_____________|_____________|____________|___________|
|Specificitate |Specimene |200 |200 |200 | >/=
98% |
|de diagnostic |negative |inclusiv |inclusiv |inclusiv |
|
| | |probe |probe |probe |
|
| | |clinice |clinice |clinice |
|
| | |50 de probe |50 de probe |50 de probe |
|
| | |potential |potential |potential |
|
| | |interferente |interferente |interferente|
|
|______________|__________|_____________|_____________|____________|___________|
Tabel 9: Grupe de sange AB0, Rhesus (C, c, D, E, e ) si Kell*)
*) Tabelul 9 este reprodus in facsimil.
______________________________________________________________________________
| | 1 | 2 | 3
|
|_________________|__________________|___________________|_____________________|
| Specificitate | Numarul de teste | Numarul total de | Numarul total de
|
| | pentru metoda | probe necesare a | probe necesare a fi
|
| | recomandata | fi testate pentru | testate pentru o
|
| | | a lansa un produs | formulare noua sau
|
| | | | utilizarea unor
|
| | | | reactivi bine
|
| | | | caracterizati
|
|_________________|__________________|___________________|_____________________|
| Anti-A, B si AB | 500 | 3.000 | 1.000
|
|_________________|__________________|___________________|_____________________|
| Anti-D | 500 | 3.000 | 1.000 |
|_________________|__________________|___________________|_____________________|
| Anti-C, c, E | 100 | 1.000 | 200
|
|_________________|__________________|___________________|_____________________|
| Anti-e | 100 | 500 | 200
|
|_________________|__________________|___________________|_____________________|
| Anti-K | 100 | 500 | 200
|
|_________________|__________________|___________________|_____________________|
Criterii de acceptare:
Toti reactivii de mai sus trebuie sa prezinte rezultate de testare
comparabile cu ale unor reactivi stabiliti cu performante acceptabile cu
privire la reactivitatea pretinsa pentru dispozitiv. Pentru reactivii
stabiliti, acolo unde aplicatia sau utilizarea a fost schimbata sau extinsa,
trebuie realizate teste suplimentare in acord cu cerintele reliefate in coloana
1 (de mai sus ).
Evaluarea performantei pentru reactivii anti-D trebuie sa includa teste
pentru o serie de probe de RhD slab si Rh partial in functie de scopul propus
al produsului.
________________________________________________________________________________
Calificari:
Probe clinice: 10% din populatia test
Specimene neonatale: > 2% din populatia test
Probe AB0: > 40% A, B pozitiv
D slab > 2% din cei Rhesus pozitivi
________________________________________________________________________________
Tabel 10: Criterii de eliberare a loturilor pentru grupele de sange AB0,
Rhesus (C, c, D, E, e) si Kell*1)
*1) Tabelul 10 este reprodus in facsimil.
Cerinte pentru specificitatea de testare pentru fiecare reactiv
1. Reactivi pentru testare
______________________________________________________________________________
| Reactivi pentru | Numarul minim de celule control
|
| grupele de sange | ce trebuie testate
|
|____________________________|_________________________________________________|
| | Reactii pozitive | | | Reactii negative
|
|_________|_________________________|_______| |__________________________|
| | A1 | A2B | Ax | | | B | 0 |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| Anti-A | 2 | 2 | 2*) | | | 2 | 2 |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| | B | A1B | | | | A1 | 0 |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| Anti-B | 2 | 2 | | | | 2 | 2 |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| | A1 | A2 | Ax | B | | 0 | |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| Anti-AB | 2 | 2 | 2 | 2 | | 4 | |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| | | | | | | | |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| | R1r | R2r | D slab | | | R'r | r''r | rr
|
|_________|________|_______|________|_______| |________|________|________|
| Anti-D | 2 | 2 | 2*) | | | 1 | 1 | 1
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| | R1R2 | R1r | r'r | | | R2R2 | r''r | rr
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| Anti-C | 2 | 1 | 1 | | | 1 | 1 | 1
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| | R1R2 | R1r | r'r | | | R1R1 | |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| Anti-c | 1 | 2 | 1 | | | 3 | |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| | R1R2 | R2r | r''r | | | R1R1 | r'r | rr
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| Anti-E | 2 | 1 | 1 | | | 1 | 1 | 1
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| | R1R2 | R2r | r''r | | | R2R2 | |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| Anti-e | 2 | 1 | 1 | | | 3 | |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| | Kk | | | | | Kk | |
|
|_________|________|_______|________|_______|
|________|________|________|
| Anti-K | 4 | | | | | 3 | |
|
|_________|________|_______|________|_______|_______|________|________|________|
*) Numai prin tehnici recomandate acolo unde este pretinsa reactivitate cu
aceste antigene.
NOTA:
Reactivii policlonali trebuie testati cu un panel de celule mai larg pentru
a confirma specificitatea si pentru a exclude prezenta unor anticorpi
contaminati nedoriti.
________________________________________________________________________________
Criterii de acceptare:
Fiecare lot de reactivi trebuie sa furnizeze rezultate fara echivoc
pozitive sau negative prin toate tehnicile recomandate in acord cu rezultatele
obtinute din datele evaluarii de performanta.
2. Materiale de control (eritrocite)
Fenotipul eritrocitelor utilizate in controlul reactivilor de tipare
sanguina prezentati mai sus trebuie confirmat utilizand dispozitive consacrate.