ORDIN
Nr. 311 din 8 august 2001
pentru aprobarea Normei sanitare veterinare privind diagnosticul, profilaxia,
supravegherea si combaterea influentei aviare
ACT EMIS DE: MINISTERUL AGRICULTURII, ALIMENTATIEI SI PADURILOR
ACT PUBLICAT IN: MONITORUL OFICIAL NR. 628 din 5 octombrie 2001
Ministrul agriculturii, alimentatiei si padurilor,
in temeiul art. 31 alin. 1 din Legea sanitara veterinara nr. 60/1974,
republicata, cu modificarile si completarile ulterioare,
in baza prevederilor art. 8 alin. (10) din Hotararea Guvernului nr. 12/2001
privind organizarea si functionarea Ministerului Agriculturii, Alimentatiei si
Padurilor, cu modificarile si completarile ulterioare,
vazand Referatul de aprobare al Agentiei Nationale Sanitare Veterinare nr.
142.508 din 10 iulie 2001,
emite urmatorul ordin:
Art. 1
Se aproba Norma sanitara veterinara privind diagnosticul, profilaxia,
supravegherea si combaterea influentei aviare, prevazuta in anexa care face
parte integranta din prezentul ordin.
Art. 2
Norma sanitara veterinara prevazuta la art. 1 este armonizata in totalitate
cu Directiva 1992/40/CEE.
Art. 3
Agentia Nationala Sanitara Veterinara este delegata sa coordoneze aducerea
la indeplinire a prezentului ordin.
Art. 4
La data intrarii in vigoare a prezentului ordin se abroga prevederile
referitoare la influenta aviara (pesta aviara) cuprinse in Norma nr. 114/1975,
partea a III-a "Masuri speciale pentru prevenirea si combaterea bolilor
infectocontagioase si parazitare".
Art. 5
Agentia Nationala Sanitara Veterinara elibereaza notele de serviciu
necesare pentru aplicarea prezentului ordin si asigura controlul respectarii
prevederilor acestuia.
Art. 6
Prezentul ordin va fi publicat in Monitorul Oficial al Romaniei, Partea I.
p. Ministrul agriculturii, alimentatiei si padurilor,
Ovidiu Natea,
secretar de stat
ANEXA 1
NORMA SANITARA VETERINARA
privind diagnosticul, profilaxia, supravegherea si combaterea influentei aviare
(pesta aviara clasica)
Art. 1
Prezenta norma sanitara veterinara defineste masurile de control care se
aplica in cazul aparitiei unui focar de influenta aviara la:
a) pasari domestice;
b) pasari salbatice: fazani, pauni, potarnichi tinute in captivitate.
Prezenta norma sanitara veterinara nu se aplica atunci cand influenta
aviara a fost diagnosticata la pasarile salbatice care traiesc in libertate;
totusi in acest caz Romania va informa Comisia Europeana despre masurile luate.
In Romania influenta aviara nu a evoluat din anul 1942, nu s-a produs
vaccin si nu s-a practicat vaccinarea pasarilor impotriva acestei boli.
Art. 2
In sensul prezentei norme sanitare veterinare se intelege prin:
a) pasari sanatoase clinic - pasarile care nu prezinta semne clinice de
boala si care provin din tari, teritorii sau ferme indemne de influenta aviara;
b) pasari conditionat sanatoase - pasarile care nu prezinta semne clinice
de boala, dar care provin din teritorii sau ferme in care au fost diagnosticate
cazuri de influenta aviara;
c) pasari infectate - pasarile la care s-a confirmat oficial diagnosticul
de influenta aviara pe baza unui buletin de analiza emis de un laborator
sanitar veterinar oficial;
d) pasari suspecte de infectie - pasarile care prezinta semne clinice care
pot fi atribuite influentei aviare;
e) pasari suspecte de contaminare - pasarile care au fost expuse direct sau
indirect la contactul cu virusul influentei aviare;
f) zona de protectie - o zona cu o raza de 3 km in jurul exploatatiei
infectate, stabilita de autoritatea sanitara veterinara competenta teritorial;
g) zona de supraveghere - o zona cu o raza de 10 km care include zona de
protectie din jurul exploatatiei infectate, stabilita de autoritatea sanitara
veterinara competenta teritorial;
h) exploatatie de pasari - orice adapost sau constructie in care sunt
cazate, intretinute sau exploatate pasarile;
i) gospodarie - totalitatea membrilor de familie - parinti, copii, frati -
sau a altor persoane care locuiesc si gospodaresc impreuna, avand buget comun
si care, dupa caz, lucreaza terenul aferent sau ingrijesc animalele, consuma si
valorifica in comun produsele obtinute;
j) proba pozitiva - organe, fragmente de organe sau produse biologice
provenite de la pasari, la care prin examene de laborator s-a confirmat
diagnosticul de influenta aviara;
k) proba negativa - organe, fragmente de organe sau produse biologice
provenite de la pasari, la care, prin examenul de laborator nu s-a confirmat
diagnosticul de influenta aviara;
l) efectiv de pasari indemn - daca in teritoriul respectiv pasarile
existente indeplinesc criteriul de sanatoase clinic sau conditionat sanatoase;
daca la examenele de laborator nu s-au inregistrat cazuri pozitive, iar
efectivele sunt supravegheate epidemiologic pentru influenta aviara in
conformitate cu recomandarile Oficiului International de Epizootii,
aplicandu-se sistemul de supraveghere, monitorizare si diagnostic;
m) efectiv de pasari suspect de contaminare - efectivul in care se
suspecteaza ca au fost introduse surse potentiale de contaminare: pasari, cutii
de transportat pasari, oua, cofraje, furaje, echipamente si altele asemenea
provenite din efective de pasari in care a fost diagnosticata anterior
influenta aviara;
n) efectiv de pasari suspect de infectie - efectivele de pasari in care au
aparut semne clinice de boala, scaderea procentului de ouat si cresterea
mortalitatii, care, pe baza leziunilor anatomopatologice, pot fi atribuite
influentei aviare;
o) efectiv de pasari contaminat - efectivul in care au fost depistate
cazuri clinice de boala, iar rezultatele examenelor de laborator au fost
pozitive pentru influenta aviara;
p) administratia veterinara centrala - serviciul veterinar central -
Agentia Nationala Sanitara Veterinara din cadrul Ministerului Agriculturii,
Alimentatiei si Padurilor, care are competenta asupra teritoriului tarii in
domeniul sanitar veterinar, notifica bolile animalelor Oficiului International
de Epizootii si tarilor cu care Romania are incheiate conventii sau acorduri
interguvernamentale de colaborare in domeniul sanitar veterinar, asigura,
monitorizeaza si controleaza punerea in aplicare a normelor si masurilor
sanitare veterinare;
r) autoritatea sanitara veterinara - serviciul veterinar de stat direct
responsabil de aplicarea masurilor sanitare veterinare;
s) medic veterinar oficial - medicul veterinar de libera practica,
imputernicit in conditiile legii sa indeplineasca unele atributii publice.
Art. 3
Romania trebuie sa declare in mod obligatoriu si imediat Comisiei Europene
orice suspiciune de influenta aviara pe teritoriul sau.
Art. 4
Supravegherea pasarilor domestice si a pasarilor salbatice tinute in
captivitate pentru influenta aviara este o problema de stat.
Administratia sanitara veterinara centrala reprezentata de Agentia
Nationala Sanitara Veterinara coordoneaza toate activitatile de supraveghere
prin:
a) Institutul de Diagnostic si Sanatate Animala;
b) Institutul pentru Controlul Produselor Biologice si Medicamentelor de Uz
Veterinar;
c) laboratoarele sanitare veterinare de stat judetene;
d) autoritatea sanitara veterinara competenta teritorial care va
supraveghea sanitar veterinar transportul si comercializarea pasarilor, oualor
si puilor;
e) proprietarul sau crescatorul de pasari domestice ori de pasari tinute in
captivitate, care este obligat sa informeze autoritatea sanitara veterinara
competenta teritorial asupra fiecarei intrari sau iesiri de pasari din
exploatatia sa sau despre concursuri ori expozitii la care are intentia sa
participe;
f) Agentia Nationala Sanitara Veterinara, care prenotifica la solicitarea
directiilor sanitare veterinare judetene si a municipiului Bucuresti toate
importurile si exporturile de pasari, produse si subproduse provenite de la
acestea, de furaje sau de alte materii prime care pot influenta sanatatea
acestora.
Art. 5
Recoltarea probelor in scop de diagnostic se efectueaza de medicul
veterinar oficial.
Examenele de laborator pentru depistarea prezentei virusului influentei
aviare - Orthomyxovirus incadrat in grupa A a genului Influenzae se efectueaza
in conformitate cu prevederile anexei nr. 1 la prezenta norma sanitara
veterinara.
Art. 6
Pentru supravegherea si prevenirea introducerii influentei aviare in
exploatatiile avicole se vor institui si se vor mentine permanent urmatoarele
masuri de profilaxie generala:
a) evidenta efectivelor de pasari pe categorii si supravegherea clinica si
anatomopatologica permanenta a tuturor pasarilor de ferma si de agrement aflate
pe teritoriul Romaniei;
b) respectarea regulilor sanitare veterinare si de zooigiena privind
popularea, hranirea, exploatarea si transportul pasarilor;
c) imprejmuirea exploatatiilor avicole astfel incat in incinta acestora sa
nu poata patrunde persoane, vehicule si animale decat printr-o intrare special
amenajata, aflata sub control sanitar veterinar;
d) construirea si amenajarea la intrarea in exploatatia avicola a unui
filtru sanitar veterinar, dimensionat in raport cu numarul personalului, in
care sa se efectueze schimbarea obligatorie a hainelor si incaltamintei de
strada cu echipament de protectie antiepizootica;
e) interzicerea intrarii in exploatatia avicola a persoanelor care nu
lucreaza direct in procesul de productie, cu exceptia organelor de control,
care vor respecta conditiile obligatorii de filtru sanitar;
f) interzicerea introducerii in ferme a altor animale decat cele care
constituie proprietatea exploatatiei - precum si a desfasurarii altor
activitati diferite de specificul acesteia;
g) mentinerea obligatorie in carantina profilactica a pasarilor care
urmeaza sa fie introduse in exploatatie;
h) asigurarea mijloacelor de transport care vor fi folosite numai in
incinta;
i) organizarea si amenajarea conform regulilor sanitare veterinare a
locurilor de depozitare a produselor de origine animala si a furajelor;
j) evacuarea dejectiilor si depozitarea lor astfel incat sa nu constituie
surse de poluare;
k) aplicarea periodica a masurilor de dezinfectie, deratizare si
dezinsectie;
l) solicitarea avizului autoritatii sanitare veterinare teritoriale la
fiecare introducere de noi efective in exploatatiile avicole, la livrarea si
trecerea pasarilor de la o categorie la alta, lotizari si alte miscari de
efective;
m) anuntarea imediata a medicului veterinar oficial la aparitia sau la suspiciunea
existentei unei boli transmisibile;
n) pana la sosirea medicului veterinar oficial se vor lua masuri de izolare
a pasarilor bolnave, moarte sau sacrificate de necesitate;
o) se interzic vanzarea si scoaterea din incinta a produselor de origine
animala, a furajelor, gunoiului si a altor materiale, pana la clarificarea
situatiei epidemiologice a exploatatiei;
p) se va urmari permanent si in mod sistematic starea de sanatate a
efectivelor prin examene clinice si necropsice in vederea depistarii la timp a
primelor suspiciuni de boala, luandu-se masuri pentru stabilirea rapida a
diagnosticului, prin examene de laborator;
r) in exploatatiile indemne se vor introduce oua pentru incubat, pui de o
zi si tineret de inlocuire numai din unitati indemne;
s) in zona de protectie a exploatatiei cu o raza de cel putin 3 km se vor
asigura supravegherea si mentinerea sanatatii efectivelor de pasari din
gospodariile populatiei prin depistari periodice si vaccinari de intretinere;
s) orice miscare interjudeteana a efectivelor de pasari va fi avizata de
Agentia Nationala Sanitara Veterinara prin directiile sanitare veterinare
judetene si a municipiului Bucuresti implicate;
t) exploatatiile avicole au obligatia sa respecte tehnologia de crestere si
tehnologia sanitara veterinara, conform legislatiei in vigoare;
t) se va organiza supravegherea sanitara veterinara permanenta a pasarilor
care se aduc in targuri, piete, expozitii;
u) periodic, la intervale de cel mult o saptamana, din exploatatiile
avicole si, dupa caz, din gospodariile populatiei se vor trimite probe la
laborator pentru examene de supraveghere sanitara veterinara;
v) expedierea probelor si interpretarea rezultatelor revin autoritatii
sanitare veterinare competente prin medicul veterinar oficial;
x) in cazul diagnosticarii influentei aviare in exploatatia avicola sau in
zonele de protectie ale acesteia, cu o raza de minimum 3 km, medicii veterinari
care asigura asistenta sanitara sunt obligati sa se informeze reciproc in mod
operativ, pentru a stabili si a aplica, cu sprijinul comandamentelor
antiepizootice locale si al celui judetean, masurile ce se impun.
Art. 7
In gospodariile populatiei supravegherea efectivelor de pasari se
realizeaza prin masuri severe privind circulatia pasarilor si a produselor
avicole care provin din acest sector, astfel:
a) medicii veterinari oficiali care asigura asistenta sanitara in acest
sector sunt obligati sa supravegheze teritoriul prin examinari clinice si
anatomopatologice ale tuturor pasarilor din gospodariile populatiei;
b) pasarile achizitionate de proprietar nu se vor introduce in efectivele
constituite decat dupa o perioada de cel putin 15 zile, cat vor fi tinute
izolate intr-un adapost separat;
c) cu ocazia vanzarii, a trecerii in proprietatea altor persoane, in cazul
taierii pentru consum public, organizarii de expozitii si in cazul oricaror
transporturi cu mijloace auto, feroviare, navale, aeriene detinatorii de pasari
sunt obligati sa posede acte care sa adevereasca proprietatea si sanatatea
pasarilor;
d) proprietarul are obligatia sa permita medicului veterinar oficial sa
verifice starea de sanatate a pasarilor din gospodarie si sa il sprijine in
efectuarea operatiunilor sanitare veterinare;
e) proprietarul este obligat sa anunte medicului veterinar oficial aparitia
unor semne de boala, de la primele cazuri de moarte sau taieri de necesitate,
iar pana la sosirea personalului sanitar veterinar, sa izoleze pasarile
bolnave, sa pastreze pe loc cadavrele, carnea, organele sau alte produse
rezultate de la pasarile taiate de necesitate, fiind interzisa folosirea sau
comercializarea acestora;
f) proprietarul are obligatia sa respecte regulile sanitare veterinare
privind conditiile de taiere a pasarilor si de valorificare a produselor
obtinute de la acestea;
g) se va organiza supravegherea sanitara veterinara permanenta a pasarilor
care se aduc in piete, targuri, expozitii etc.
Art. 8
1. Atunci cand efectivele de pasari dintr-o exploatare sunt suspectate de
infectie sau de contaminare cu virusul influentei aviare, medicul veterinar
oficial responsabil de exploatare va intreprinde masuri oficiale de
investigatii care sa confirme sau sa infirme prezenta bolii, va preleva probe
necesare pentru examenul de laborator si va asigura notificarea obligatorie si
imediata a suspiciunii influentei aviare catre autoritatea sanitara veterinara
teritoriala.
2. De indata ce a fost notificata suspiciunea de infectie, autoritatea
sanitara veterinara teritoriala va plasa sub supraveghere oficiala exploatarea
si va cere, in special, ca:
a) sa se instituie evidenta pe categorii de pasari, din care sa reiasa
numarul de pasari existente, numarul de pasari moarte, numarul de pasari cu
semne clinice si fara semne clinice; aceste date se vor tine la zi pentru a se
tine seama de pasarile eclozionate sau care au murit pe parcursul perioadei de
suspiciune; datele acestor inregistrari vor fi actualizate si vor fi prezentate
la cererea medicului veterinar de stat sau a autoritatii sanitare veterinare;
b) pasarile din exploatatia suspecta vor ramane in adaposturile existente,
evitandu-se contactul cu alte pasari;
c) nici o pasare nu va intra sau nu va iesi din exploatatie;
d) toate miscarile de persoane, animale, vehicule, ustensile din si spre
exploatatie, de carne de pasare ori carcase, de furaje, deseuri, asternut,
gunoi de grajd sau orice altceva, care ar putea transmite influenta aviara, se
vor face cu avizul autoritatii sanitare veterinare teritoriale;
e) intreaga productie de oua obtinuta, indiferent de profilul fermei
contaminate - de selectie, reproductie sau productie pentru consum -, va fi
dirijata pana la elucidarea diagnosticului spre o intreprindere abilitata
pentru fabricarea si/sau prelucrarea produselor din oua, in conditii de
supraveghere de catre autoritatea sanitara veterinara teritoriala. Transportul
oualor mentionate anterior se va autoriza conform anexei nr. 2 la prezenta
norma sanitara veterinara de catre autoritatea sanitara veterinara competenta
teritorial;
f) se vor folosi mijloace corespunzatoare de dezinfectie la intrarea si
iesirea din halele de pasari, precum si din exploatatii;
g) se va efectua o ancheta epidemiologica in conformitate cu art. 9 lit.
g).
3. Atata timp cat masurile oficiale stabilite de autoritatea sanitara
veterinara competenta sunt in vigoare, proprietarul oricaror exploatari la care
este suspectata boala va lua toate masurile necesare pentru a asigura
respectarea prevederilor pct. 2, cu exceptia lit. g).
4. Autoritatea sanitara veterinara competenta poate aplica orice masura
prevazuta la pct. 2 pentru alte exploatatii daca situarea lor, configuratia lor
sau contactele cu alte exploatari ofera motive pentru a suspecta posibila
contaminare.
5. Masurile mentionate la pct. 1 si 2 nu vor fi ridicate pana cand
suspiciunea de influenta aviara nu va fi infirmata de medicul veterinar
oficial.
Art. 9
1. Dupa confirmarea oficiala a diagnosticului de influenta aviara se
notifica imediat boala prin telefon, fax, telex la directia sanitara veterinara
judeteana, respectiv a municipiului Bucuresti, Agentia Nationala Sanitara
Veterinara, Institutul de Diagnostic si Sanatate Animala, Oficiul International
de Epizootii si la Comisia Europeana.
Din momentul in care prezenta influentei aviare a fost confirmata oficial
in exploatatie autoritatea sanitara veterinara teritoriala se va asigura ca
autoritatea sanitara veterinara locala instituie, pe langa masurile prezentate
la art. 8 pct. 2, urmatoarele masuri:
a) toate pasarile din exploatatie se sacrifica pe loc fara intarziere;
toate pasarile care au murit sau care au fost sacrificate, precum si toate
ouale se distrug; aceste operatiuni se vor efectua astfel incat sa reduca
riscul raspandirii bolii;
b) orice material sau deseu, cum ar fi: furajele, asternutul sau gunoiul de
grajd susceptibil de a fi contaminat, va fi distrus sau tratat in mod
corespunzator. Acest tratament va asigura distrugerea virusului influentei
aviare si va fi efectuat in conformitate cu instructiunile medicului veterinar
oficial;
c) atunci cand pasarile domestice dintr-o exploatatie au fost sacrificate
in cursul perioadei probabile de incubatie a bolii, carnea provenita de la
aceste pasari va fi, oriunde este posibil, identificata si distrusa;
d) ouale de incubatie livrate sau transferate din exploatatie in cursul
perioadei probabile de incubatie vor fi identificate si distruse; puii care au
eclozionat din aceste oua vor fi plasati sub supraveghere sanitara veterinara
oficiala; ouale de consum livrate in timpul perioadei probabile de incubatie a
bolii care au fost transferate din exploatatie vor fi identificate si distruse,
cu exceptia celor care au fost anterior dezinfectate in mod corespunzator;
e) dupa efectuarea operatiunilor prezentate la lit. a) si b) spatiile
folosite pentru cazarea pasarilor, imprejurimile lor, vehiculele utilizate
pentru transport si toate echipamentele posibil sa fie contaminate vor fi
curatate si dezinfectate in conformitate cu prevederile art. 14 si ale anexei
nr. 3 la prezenta norma sanitara veterinara;
f) nici o pasare nu va fi reintrodusa in exploatatie decat dupa cel putin
21 de zile de la terminarea actiunilor prevazute la lit. e);
g) efectuarea anchetei epidemiologice care va avea in vedere: perioada in
care influenta aviara ar fi putut exista in exploatatie; originea posibila a
influentei aviare in exploatatie si identificarea altor exploatatii in care se
gasesc pasari domestice sau alte pasari tinute in captivitate, care ar putea fi
infectate sau contaminate din aceeasi sursa; circulatia personalului, a
pasarilor domestice sau a altor pasari tinute in captivitate, a altor animale,
vehiculelor, oualor, carnii si carcaselor, precum si a oricaror ustensile sau
materiale care pot vehicula virusul influentei aviare din sau spre exploatatia
respectiva.
2. Autoritatea sanitara veterinara competenta poate extinde masurile
prevazute la pct. 1 la alte exploatatii invecinate daca localizarea,
configuratia lor sau contactul cu exploatatia in care boala a fost confirmata
ofera suficiente motive pentru a suspiciona posibila contaminare.
3. In cazul in care exploatatiile sunt constituite din doua sau din mai
multe efective separate, autoritatea sanitara veterinara locala, in
conformitate cu criteriile stabilite de autoritatea sanitara veterinara
teritoriala, poate acorda o derogare de la cerintele art. 9 pct. 1 lit. a) -
f). Aceasta derogare se acorda numai pentru efectivele sanatoase din
exploatatia infectata, cu conditia ca medicul veterinar oficial sa confirme ca
operatiunile de cazare, crestere si hranire sunt complet separate, astfel incat
virusul sa nu poata difuza de la un efectiv la altul.
4. Pentru a se asigura coordonarea integrala a masurilor necesare in
vederea eradicarii influentei aviare cat mai repede posibil, va fi constituit
un grup de criza.
5. Acolo unde medicul veterinar oficial are motive sa suspicioneze ca
pasarile dintr-o unitate au fost contaminate ca urmare a circulatiei
persoanelor, animalelor si vehiculelor sau in orice alt mod, acesta are
calitatea sa plaseze aceste exploatatii sub control sanitar veterinar oficial
conform pct. 6.
6. Scopul controlului sanitar veterinar oficial este de a depista imediat
orice suspiciune de influenta aviara, de a numara pasarile si de a monitoriza
circulatia lor, iar daca este cazul se vor efectua actiunile prevazute la pct.
7.
7. Cand o exploatatie este supusa controlului sanitar veterinar oficial sub
incidenta prevederilor pct. 5 si 6, autoritatea sanitara veterinara competenta
teritorial va institui masuri prohibitive cu privire la transferul pasarilor
din exploatatie, cu exceptia transportului direct la abator, facut sub
supraveghere sanitara veterinara oficiala, cu destinatia sacrificarii imediate.
Inaintea acordarii unei astfel de autorizari medicul veterinar oficial trebuie
sa execute examenul clinic al pasarilor pentru a exclude prezenta influentei
aviare in exploatatie. Restrictiile de circulatie la care se face referire in
acest punct se impun pe o perioada de 21 de zile de la ultima data a posibilei
contaminari; totusi aceste restrictii se vor aplica pentru o perioada de cel
putin 7 zile.
Art. 10
In cazul confirmarii influentei aviare in gospodariile populatiei boala se
declara oficial, se instituie masurile de carantina si se dispune sacrificarea
pasarilor din curtea sau curtile contaminate, sub supravegherea medicului
veterinar oficial.
Pasarile sacrificate si ouale vor fi distruse in scopul reducerii la
minimum a riscului de raspandire a bolii.
Adaposturile si curtea sau curtile respective vor fi dezinfectate.
Nici o pasare nu va fi reintrodusa in gospodarie decat la cel putin 21 de
zile dupa terminarea operatiunilor de dezinfectie.
Pe perioada de carantina se interzice vanzarea in piete si targuri a
pasarilor vii si a oualor.
Angajatii exploatatiilor avicole in ale caror gospodarii a fost depistata
boala nu vor mai fi admisi la lucru decat dupa 7 zile de la lichidarea
pasarilor din gospodarie si dupa efectuarea dezinfectiei finale.
Activitatea de depistare va continua pana la ridicarea masurilor de
carantina.
Art. 11
1. Atunci cand medicul veterinar oficial are motive sa suspicioneze ca
pasarile domestice din orice exploatatie ar putea fi contaminate ca rezultat al
miscarilor de personal, animale, vehicule sau in orice alt mod, acea
exploatatie va fi plasata sub control oficial in conformitate cu prevederile
pct. 2.
2. Scopul controlului oficial este de a detecta imediat orice suspiciune de
influenta aviara, de a face recensamantul pasarilor, de a monitoriza miscarile
lor si, daca este necesar, de a lua orice masura care sa limiteze extinderea
bolii.
3. Atunci cand o exploatatie este supusa controlului oficial in conditiile
pct. 1 si 2, autoritatea sanitara veterinara competenta va interzice orice
transfer de pasari din exploatatie, cu exceptia transportului direct spre un
abator sub supraveghere oficiala, in scopul sacrificarii imediate. Inaintea
acordarii unei astfel de autorizatii medicul veterinar oficial trebuie sa
efectueze un examen clinic al tuturor pasarilor pentru a exclude prezenta in
exploatatie a influentei aviare. Restrictiile de transfer la care se face
referire in acest articol vor fi impuse pentru o perioada de 21 de zile de la
ultima data a posibilei contaminari; totusi aceste restrictii trebuie sa se
aplice pentru o perioada de cel putin 7 zile.
4. Atunci cand se considera ca este posibil, autoritatea competenta poate
limita masurile prevazute in acest articol la o parte a exploatatiei si la pasarile
din aceasta, cu conditia ca pasarile sa fi fost cazate, crescute si furajate
complet separat de catre personal separat.
Art. 12
1. Autoritatea sanitara veterinara va institui in jurul exploatatiei
infectate o zona de protectie cu o raza de cel putin 3 km, care este inclusa
intr-o zona de supraveghere cu o raza de cel putin 10 km. La instituirea
acestor zone se va tine seama de factorii geografici, administrativi, ecologici
si epidemiologici legati de influenta aviara, precum si de posibilitatile de
monitorizare.
2. In zona de protectie se aplica urmatoarele masuri:
a) identificarea tuturor exploatatiilor din zona care detin pasari
domestice si pasari salbatice in captivitate;
b) inspectii periodice la toate exploatatiile din zona care detin pasari,
examinarea clinica a acestor pasari, iar daca este necesar, recoltarea de probe
pentru examen de laborator; se va tine o evidenta stricta a inspectiilor si a
constatarilor facute;
c) pasarile trebuie sa fie crescute in hale sau in adaposturi care sa poata
fi izolate;
d) la intrarea si la iesirea din exploatatie trebuie sa existe mijloace de
dezinfectie corespunzatoare;
e) trebuie sa fie puse sub control circulatia persoanelor care manipuleaza
pasari, carcase de pasare si oua, vehiculele cu care se transporta pasarile,
carcasele si ouale in interiorul zonei; transportul pasarilor va fi interzis,
cu exceptia tranzitului pe autostrazi sau pe calea ferata;
f) se va interzice transferul de pasari sau oua de incubat din exploatatia de
origine, cu exceptia celui autorizat de autoritatea sanitara veterinara,
astfel:
- pasarile vor fi taiate imediat intr-un abator, de preferinta localizat in
zona infectata, sau daca acest lucru nu este posibil, intr-un abator desemnat
de autoritatea sanitara veterinara si situat in afara zonei infectate; un
marcaj special de salubritate - constand intr-o cruce diagonala formata din
doua linii drepte, incrucisate in unghi drept, cu punctele de intersectie in
centrul stampilei - trebuie sa fie aplicat pe aceasta carne de pasare;
- puii in varsta de o zi si puicutele inainte de ouat se transporta spre o
exploatatie aflata in zona de supraveghere in care nu se mai gasesc alte
pasari;
- ouale de incubat destinate unei statii de incubatie desemnate de
autoritatea sanitara veterinara; inaintea expedierii ouale si ambalajele lor
trebuie sa fie dezinfectate;
- toate aceste transferuri permise se vor executa direct sub control
oficial; ele vor fi autorizate numai dupa ce medicul veterinar oficial a efectuat
inspectia sanitara a exploatatiei; mijloacele de transport folosite trebuie sa
fie curatate si dezinfectate inainte si dupa folosire;
g) transportul asternutului sau al dejectiilor se va face numai cu aviz
sanitar veterinar;
h) vor fi interzise targurile, pietele, expozitiile sau alte forme de
aglomerari de pasari domestice sau de alte pasari.
3. Masurile aplicate in zona de protectie se vor mentine cel putin 21 de
zile de la efectuarea operatiunilor de curatare si dezinfectie preliminara in
exploatatia infectata; dupa aceasta perioada zona de protectie va fi inclusa in
zona de supraveghere sanitara veterinara.
4. In zona de supraveghere sanitara veterinara se aplica urmatoarele
masuri:
a) identificarea tuturor exploatatiilor din zona, care detin pasari
domestice;
b) controlul circulatiei pasarilor si oualor de incubat din interiorul
zonei;
c) interzicerea circulatiei pasarilor domestice in afara zonei pe parcursul
primelor 15 zile, cu exceptia transportului direct catre un abator desemnat de
autoritatea sanitara veterinara, situat in afara zonei de supraveghere; carnea
provenita de la aceste pasari va fi insotita de un marcaj special de
salubritate;
d) interzicerea circulatiei oualor de incubat in afara zonei de supraveghere
sanitara veterinara, cu exceptia celor destinate unei statii de incubatie
desemnate de autoritatea sanitara veterinara; inainte de expediere ouale si
ambalajele lor trebuie sa fie dezinfectate;
e) interzicerea circulatiei asternutului si a dejectiilor in afara zonei de
supraveghere sanitara veterinara;
f) interzicerea targurilor, pietelor, expozitiilor si a altor aglomerari de
pasari domestice sau de alte pasari;
g) fara a aduce prejudicii dispozitiilor lit. a) si b), se interzice
transportul pasarilor, cu exceptia tranzitului pe autostrazi sau cai ferate.
5. Masurile care se aplica in zona de supraveghere sanitara veterinara se
mentin cel putin 30 de zile de la efectuarea operatiunilor de curatare si
dezinfectie in exploatatia infectata.
Art. 13
Toti detinatorii de pasari, indiferent de forma de proprietate, sunt
obligati sa aplice si sa respecte prevederile prezentei norme sanitare
veterinare.
Autoritatea sanitara veterinara teritoriala stabileste planurile care sa ii
permita sa identifice circulatia oualor, pasarilor domestice si pasarilor
tinute in captivitate.
Proprietarul sau crescatorul pasarilor domestice si/sau al pasarilor tinute
in captivitate este obligat sa prezinte autoritatii sanitare veterinare
teritoriale, la cererea acesteia, informatii cu privire la pasarile domestice
si la ouale care au intrat sau au iesit din exploatatia sa, precum si despre
concursurile sau expozitiile la care au participat.
Persoanele juridice si fizice implicate in transportul sau comercializarea
pasarilor domestice, oualor sau a pasarilor tinute in captivitate sunt obligate
sa prezinte autoritatii sanitare veterinare informatii cu privire la circulatia
pasarilor domestice, oualor si pasarilor tinute in captivitate, pe care le-au transportat
sau le-au comercializat, si sa furnizeze toate detaliile cu privire la aceste
informatii.
Art. 14
Dezinfectantele care se vor utiliza si concentratiile lor sunt cele
aprobate de autoritatea sanitara veterinara teritoriala.
Operatiunile de curatare si dezinfectie se vor efectua sub supravegherea
medicului veterinar oficial, in conformitate cu instructiunile medicului
veterinar de stat, conform reglementarilor in vigoare si prevederilor anexei
nr. 3 la prezenta norma sanitara veterinara.
Art. 15
Folosirea in hrana pasarilor domestice a resturilor culinare care provin de
la mijloacele de transport international - vapoare, autovehicule sau avioane -
este interzisa. Aceste resturi culinare vor fi colectate si distruse sub
control sanitar veterinar.
Folosirea resturilor culinare sau a resturilor de pasari poate fi avizata
pentru hranirea pasarilor domestice numai dupa o prelucrare termica
corespunzatoare, care asigura distrugerea virusului influentei aviare in
conditiile prevazute de legislatia sanitara veterinara.
Art. 16
Autoritatea sanitara veterinara locala va lua toate masurile pentru
informarea persoanelor stabilite in zona de protectie si supraveghere sanitara
veterinara despre restrictiile impuse si stabileste planul de masuri.
Art. 17
1. Laboratorul sanitar veterinar national de referinta pentru influenta
aviara este Laboratorul de patologie aviara din cadrul Institutului de
Diagnostic si Sanatate Animala (I.D.S.A.), care confirma rezultatele
laboratoarelor sanitare veterinare de stat judetene si al municipiului
Bucuresti, si testeaza reagentii folositi de aceste laboratoare.
2. Institutul national pentru verificarea calitatii si valabilitatii
vaccinurilor este Institutul pentru Controlul Produselor Biologice si
Medicamentelor de Uz Veterinar (I.C.P.B.M.V.).
3. Institutele nationale de referinta I.D.S.A. si I.C.P.B.M.V. sunt
responsabile pentru aplicarea si coordonarea standardelor si metodelor de
diagnostic, pentru utilizarea reagentilor si testarea produselor biologice.
4. Institutul de Diagnostic si Sanatate Animala va fi responsabil pentru
aplicarea si respectarea standardelor si metodelor in fiecare laborator sanitar
veterinar de stat judetean si al municipiului Bucuresti pentru diagnosticul influentei
aviare. In acest scop:
a) va organiza periodic teste comparative;
b) va pastra izolatele de virus ale influentei aviare provenind de la
cazurile confirmate;
c) va asigura confirmarea rezultatelor pozitive obtinute de laboratoarele
sanitare veterinare de stat pentru diagnostic.
5. Laboratoarele nationale de referinta I.D.S.A. si I.C.P.B.M.V. vor pastra
legatura cu laboratoarele veterinare comunitare de referinta la care se face
referire in anexele nr. 4 si 5 la prezenta norma sanitara veterinara.
Art. 18
1. Decizia de a introduce vaccinarea in completarea masurilor de control va
fi luata de autoritatea sanitara veterinara centrala in colaborare cu Comisia
Europeana si cu celelalte state membre. Aceasta decizie va avea in vedere
urmatoarele:
a) singurele vaccinuri permise sunt cele care au primit avizul de
comercializare din partea autoritatii sanitare veterinare competente;
b) caracteristicile si compozitia vaccinului care se va folosi;
c) procedurile pentru supravegherea distribuirii, depozitarii si folosirii
vaccinurilor;
d) densitatea pasarilor din zona afectata;
e) speciile si categoriile de pasari care vor fi supuse vaccinarii;
f) zonele in care se va efectua vaccinarea.
2. Prin derogare de la prevederile pct. 1 decizia de introducere a
vaccinarii de urgenta in jurul focarului poate fi luata de autoritatea sanitara
veterinara centrala, dupa notificarea catre Comisia Europeana, cu conditia ca
interesele fundamentale ale Comunitatii Europene sa nu fie puse in pericol.
3. Atunci cand autoritatea sanitara veterinara teritoriala este autorizata
de catre autoritatea sanitara veterinara centrala sa recurga la vaccinarea de
urgenta intr-o regiune limitata a teritoriului sau, statutul teritoriului ramas
nu va fi afectat, cu conditia ca circulatia efectivelor de pasari vaccinate sa
fie interzisa timp de 3 luni.
Art. 19
1. Romania va stabili un plan de contingenta specificand masurile nationale
ce vor fi implementate in eventualitatea aparitiei unui focar de influenta
aviara. Acest plan trebuie sa permita accesul la dotari, echipamente, personal
si la alte materiale corespunzatoare, necesare pentru eradicarea rapida si
eficienta a focarului de boala.
2. Criteriile care se vor aplica la stabilirea acestui plan sunt cele
prevazute in anexa nr. 6 la prezenta norma sanitara veterinara.
3. Planurile stabilite in conformitate cu criteriile prezentate in anexa
nr. 6 vor fi prezentate Comisiei Europene nu mai tarziu de 6 luni de la punerea
in aplicare a prezentei norme sanitare veterinare.
4. Comisia Europeana va examina planurile pentru a determina daca permit
realizarea obiectivelor dorite si va sugera Romaniei orice amendament, in
special pentru a se asigura ca ele sunt compatibile cu planurile celorlalte
state membre. Planurile pot fi ulterior amendate sau completate in functie de
evolutia situatiei.
Art. 20
Expertii Agentiei Nationale Sanitare Veterinare, in colaborare cu
autoritatile competente locale, in masura in care este necesar pentru a asigura
aplicarea uniforma a prezentei norme sanitare veterinare, vor efectua controale
la fata locului. Pentru a realiza acest lucru ei pot controla un procentaj
reprezentativ al unitatilor pentru a verifica daca autoritatile sanitare
veterinare competente locale controleaza si daca unitatile avicole indeplinesc
cerintele acestei norme sanitare veterinare.
Art. 21
Fondurile necesare pentru controlul aplicarii prezentei norme sanitare
veterinare se asigura conform legislatiei in vigoare.
Art. 22
Prezenta norma sanitara veterinara este armonizata in totalitate cu
Directiva 1992/40/CEE.
Art. 23
Anexele nr. 1 - 6 fac parte integranta din prezenta norma sanitara
veterinara.
ANEXA 1
la norma sanitara veterinara
METODE DE DIAGNOSTIC
pentru confirmarea diagnosticului si pentru diagnosticul diferential al
influentei aviare
Virusul responsabil de producerea influentei aviare este virusul prototip
al familiei Orthomyxoviridae tip A. In prezent sunt clasificate serologic 15
subtipuri pe baza hemaglutininei (H1 - H15) si 9 subtipuri pe baza
neuraminidazei (N1 - N9). Toate subtipurile au fost identificate la pasari,
insa subtipurile H5 si H7 au patogenitate mare pentru pasari, producand boala
sistemica cu mortalitate mare. In scopul procedeelor de diagnostic pentru
confirmare si pentru diagnostic diferential influenta aviara este definita
astfel:
Influenta aviara este infectia pasarilor produsa de orice virus din genul
influenta virus tip A, care are un indice de patogenitate intravenoasa (IPIV)
mai mare de 1,2, efectuat pe pui in varsta de 6 saptamani, sau orice infectie
cu virusul influentei tip A subtipul H5 sau H7, pentru care secventele de
nucleotide au demonstrat prezenta de multiple baze de aminoacizi la situsul de
clivaj al hemaglutininei.
CAP. 1
Esantionarea si tratamentul probelor
1. Probe: tampoane cloacale sau fecale si tampoane traheale de la pasari
bolnave; fecale sau continut de organe: intestin, encefal, trahee, pulmon,
ficat, splina si altele, afectate evident, provenind de la cadavre proaspete.
2. Prelucrarea probelor
Organele si tesuturile mentionate la pct. 1 pot fi comasate, dar materiile
fecale trebuie sa fie tratate separat. Tampoanele vor fi puse in mediu tampon
fosfat salin cu antibiotice, in cantitate suficienta, astfel incat sa asigure
intreaga imersie. Probele de organe si fecale se vor omogeniza cu ajutorul unui
omogenizator inchis sau cu un mojar cu nisip steril intr-un mediu cu
antibiotice pana la obtinerea unei suspensii de 10 - 20% g/volum. Se lasa in
repaus suspensia circa 2 ore la temperatura ambianta sau mai mult timp la
temperatura de 4 grade C apoi se clarifica prin centrifugare, de exemplu, la
800 - 1.000 rotatii/minut timp de 10 minute.
3. Mediul tampon fosfat salin cu antibiotice. Diferite laboratoare
utilizeaza cu succes diverse formule de mediu tampon fosfat salin cu
antibiotice, iar laboratoarele sanitare veterinare nationale sunt in masura sa
ofere recomandari in acest sens. Sunt necesare concentratii marite de
antibiotice pentru esantioanele de fecale. Este tipica utilizarea urmatoarelor
antibiotice: 10.000 UI/ml penicilina, 10 mg/ml streptomicina, 0,25 mg/ml
gentamicina si 5.000 UI/ml micostatin intr-o solutie tampon fosfat salin. Aceste
niveluri pot fi de 5 ori mai mici pentru tesuturi si tampoane traheale. Pentru
controlul clamydiilor este acceptata adaugarea a 50 mg/ml oxitetraciclina. Pe
parcursul prepararii mediilor TFS cu antibiotice este necesar ca pH sa fie
controlat dupa adaugarea antibioticelor si ajustat pentru obtinerea unui pH
cuprins intre 7,0 - 7,4.
CAP. 2
Izolarea virusului pe oua embrionate de gaina
Se inoculeaza 0,1 - 0,2 ml din supernatantul clarificat in cavitatea
alantoidiana de la cel putin 4 oua embrionate de gaina puse la incubat timp de
8 - 10 zile. Ideal ar fi ca aceste oua sa provina de la un efectiv liber de
germeni specifici patogeni, dar, daca nu este posibil, este admisa utilizarea
oualor provenite de la un efectiv recunoscut liber de anticorpi contra
influentei aviare. Ouale inoculate sunt incubate la temperatura de 37 grade C
si se efectueaza zilnic mirajul. Pe masura ce embrionii mor, ouale continand
embrioni morti sau muribunzi, precum si toate ouale ramase dupa 6 zile de la
inoculare vor fi refrigerate la temperatura de 4 grade C si vor face obiectul
unor depistari ale hemaglutininei, plecandu-se de la lichidul
alantoidian/amniotic. In absenta hemaglutinarii se va repeta aceasta procedura
utilizandu-se ca inoculum lichid alantoidian/amniotic nediluat.
In cazul prezentei bacteriilor in lichidele hemaglutinante, acestea se
exclud prin filtrare printr-o membrana cu porii de 450 nm, se adauga un
supliment de antibiotice si se reinoculeaza pe oua embrionate.
CAP. 3
Diagnosticul diferential
1. Diferentiere preliminara. Toate virusurile hemaglutinante trebuie sa fie
prezentate Institutului de Diagnostic si Sanatate Animala, in scopul
identificarii complete, al caracterizarii si al efectuarii testelor de
patogenitate. Este important ca prin masurile sanitare veterinare privind
controlul influentei aviare sa se limiteze propagarea virusului, iar
laboratorul sanitar veterinar national de referinta trebuie sa identifice orice
tulpina hemaglutinanta de virus izolata din subtipurile H5 si H7. Lichidele
hemaglutinante se utilizeaza intr-o reactie de hemaglutinare descrisa la cap. 5
si 6. Reactia de inhibare a hemaglutinarii pozitiva cu un titru de 2^4 sau mai
mare, efectuata cu un antiser policlonal specific pentru subtipurile H5 sau H7 ale
virusului influentei aviare tip A cu titru de cel putin 2^9, da posibilitatea
identificarii virusului si instituirii unor masuri preliminare de control al
bolii.
2. Confirmarea identificarii
Laboratorul sanitar veterinar national de referinta trebuie:
a) sa confirme ca izolatul este un virus influenta A, utilizand testul de
dubla imunodifuzie pentru detectarea antigenelor de grup, astfel cum este
descris la cap. 9; tehnicile de imunofluorescenta sau ELISA pentru detectarea
antigenelor de grup pot fi utilizate daca sunt preferate de laboratoarele
nationale;
b) sa determine daca izolatele fac parte din subtipurile H5 sau H7;
c) sa efectueze indexul patogenitatii intravenoase - IPIV pe pui in varsta
de 6 saptamani, astfel cum este descris la cap. 7.
Indexul patogenitatii intravenoase mai mare de 1,2 indica prezenta
virusului si necesita aplicarea masurilor de control; ar fi util ca
laboratoarele sanitare veterinare nationale sa efectueze si teste in vederea
determinarii capacitatii unui izolat de a produce plaje in culturile celulare,
astfel cum este descris la cap. 8.
Laboratoarele sanitare veterinare nationale trebuie sa trimita imediat
toate izolatele H5 si H7 de influenta aviara la laboratoarele veterinare
comunitare de referinta pentru caracterizare.
3. Tipizarea suplimentara si caracterizarea izolatelor
Laboratorul veterinar comunitar de referinta trebuie sa primeasca toate
virusurile hemaglutinante de la laboratoarele nationale, pentru studii
suplimentare antigenice si genetice, care vor permite intelegerea superioara a
epidemiologiei bolii din Comunitatea Europeana, in cadrul competentelor si
sarcinilor laboratorului veterinar comunitar de referinta. Acesta trebuie sa
efectueze tipizarile antigenice pentru toate virusurile influenta primite.
Pentru virusurile H5 si H7 care nu au IPIV mai mare de 1,2 trebuie sa fie
efectuata si secventializarea nucleotidelor genei, care codifica hemaglutinina
cu scopul de a determina prezenta multiplelor baze de aminoacizi la situsul de
clivare a hemaglutininei.
CAP. 4
Teste serologice pentru detectarea anticorpilor virusului influentei aviare
1. Pe durata programelor de eradicare, acolo unde subtipul H al virusului
responsabil este cunoscut, sau prin utilizarea virusului omolog ca antigen,
monitorizarea serologica pentru evidentierea infectiei poate fi facuta pe baza
testelor de inhibare a hemaglutinarii descrise la cap. 5 si 6. Daca subtipul
hemaglutininic nu este cunoscut, evidentierea infectiei cu virusul influenta A
poate fi facuta prin detectarea anticorpilor directionata spre grupul de
antigene specifice. In acest scop poate fi folosit fie un test de dubla
imunodifuzie (cap. 9), fie un test ELISA. Pasarile salbatice de apa dau rar
rezultate pozitive la testul de dubla imunodifuzie si, in afara de faptul cand
subtipul este cunoscut, este probabila examinarea acelorasi pasari pentru
prezenta anticorpilor contra subtipurilor H5 si H7.
2. a) Probe
Probele de sange trebuie luate de la toate pasarile, daca marimea efectivului
este mai mica de 20, si de la 20 de pasari de la efective mai mari; aceasta va
da o probabilitate de 99% in detectarea a cel putin unor probe pozitive, daca
25% sau mai mult din efectiv este pozitiv. Serurile trebuie separate de cheag
si trimise pentru testare.
b) Examinarea pentru anticorpi
Probe individuale de ser trebuie testate pentru capacitatea inhibarii
hemaglutinarii antigenului influentei aviare intr-un test standard descris la
cap. 6. Exista discutii asupra utilizarii in testul de inhibare a
hemaglutinarii - IH a 4 sau 8 unitati hemaglutinante. Oricare dintre cele doua
variante este valabila, iar alegerea trebuie facuta de laboratoarele sanitare
veterinare nationale; totusi antigenul utilizat va influenta nivelul la care un
ser este considerat pozitiv pentru 4 unitati hemaglutinante; un ser pozitiv
este cel care are un titru egal sau mai mare de 2^4; pentru 8 unitati
hemaglutinante un ser pozitiv este serul cu un titru de 2^3 sau mai mare.
CAP. 5
Reactia de hemaglutinare - HA
Reactivi:
1. Tampon fosfat salin 0,05 M cu un pH cuprins intre 7,0 si 7,4
2. Se recolteaza eritrocitele de la cel putin 3 pui de gaina liberi de
germeni specifici patogeni; daca nu avem la dispozitie, se recolteaza sangele
de la 3 pasari controlate regulat si recunoscute ca fiind libere de anticorpi
contra virusului influentei aviare si se pun intr-un volum egal de solutie
Alsever. Se spala eritrocitele de 3 ori cu tampon fosfat salin inainte de
utilizare. Pentru test este recomandata o suspensie de 1% valoarea
hematocritului in tampon fosfat salin.
3. Laboratorul de referinta comunitar va recomanda utilizarea ca antigene
standard virusurile H5 si H7 cu virulenta scazuta.
Metoda de lucru:
a) se distribuie cate 0,025 ml tampon fosfat salin in fiecare godeu al unei
microplaci din material plastic - se utilizeaza cele cu fundul in forma de V;
b) se adauga 0,025 ml suspensie de virus, adica lichid alantoidian in
primul godeu;
c) se utilizeaza un microdilutor si se realizeaza dilutii binare de la 1/2
la 1/4096 din godeu in godeu;
d) se adauga 0,025 ml tampon fosfat salin in fiecare godeu;
e) se adauga 0,025 ml eritrocite 1% in fiecare godeu;
f) se amesteca agitand usor si se lasa in repaus la temperatura de 4 grade
C;
g) se citesc placile dupa 30 - 40 de minute de la terminarea sedimentarii
martorilor. Se citesc placile prin inclinare, pentru a observa prezenta sau
absenta unui flux de hematii in forma de lacrima;
h) titrul hemaglutinant corespunde dilutiei celei mai mari care a
determinat aglutinarea completa a hematiilor. Aceasta dilutie este considerata
ca avand o unitate hemaglutinanta. O metoda mai precisa pentru determinarea
titrului hemaglutinant consta in realizarea reactiei de hemaglutinare cu
virusul intr-o gama completa de dilutii initiale de tip 1/3, 1/4, 1/5, 1/6 ...
etc. Aceasta metoda este recomandata pentru prepararea precisa a antigenului
destinat reactiei de inhibare a hemaglutinarii.
CAP. 6
Reactia de inhibare a hemaglutinarii - IHA
Reactivi (vezi cap. 5):
a) tampon fosfat salin;
b) lichid alantoidian continand virus, diluat in tampon fosfat salin si
avand 4 sau 8 unitati hemaglutinante/0,025 ml;
c) eritrocite 1% de pui;
d) ser de pui martor negativ;
e) ser martor pozitiv.
Metoda de lucru:
a) se distribuie 0,025 ml tampon fosfat salin in toate godeurile unei
microplaci din material plastic - godeurile au fundul in forma de V;
b) se adauga 0,025 ml ser in primul godeu al placii;
c) se utilizeaza un microdilutor pentru realizarea dilutiilor duble din
godeu in godeu;
d) se adauga 0,025 ml lichid alantoidian continand 4 sau 8 unitati
hemaglutinante;
e) se amesteca agitand usor si se lasa in repaus placa la temperatura de 4
grade C minimum 60 de minute sau la temperatura ambianta cel putin 30 de
minute;
f) se adauga 0,025 ml din suspensia de eritrocite 1% in toate godeurile;
g) se amesteca agitand usor si se lasa in repaus la temperatura de 4 grade
C;
h) se citeste placa dupa 30 - 40 de minute, la sedimentarea hematiilor
martor. Se face citirea prin inclinarea placii pentru a se observa prezenta sau
absenta unui flux in forma de lacrima, care se inclina in acelasi mod cu
godeurile martor care contin numai hematii - 0,025 ml si tampon fosfat salin -
0,025 ml;
i) titrul inhibohemaglutinant corespunde dilutiei celei mai mari de antiser
care a determinat o inhibare completa a 4 sau 8 unitati de virus - pentru
fiecare test de inhibare a hemaglutinarii trebuie sa fie inclusa titrarea hemaglutinarii
pentru confirmarea numarului cerut de unitati hemaglutinante;
j) validarea rezultatelor depinde de obtinerea unui titru mai mic de 2^3 in
cazul folosirii a 4 unitati hemaglutinante sau de 2^2 pentru 8 unitati
hemaglutinante, cu serul martor negativ si un titru al dilutiei imediat
superioare sau inferioare titrului cunoscut al serului martor pozitiv.
CAP. 7
Indicele de patogenitate pe cale intravenoasa
1. Se dilueaza 1:10 lichid alantoidian cu reactie pozitiva la
hemaglutinare, proaspat recoltat, in ser fiziologic steril - titrul
hemaglutinant trebuie sa fie mai mare de 2^4.
2. Se injecteaza pe cale intravenoasa 0,1 ml din suspensia diluata de virus
la 10 pui in varsta de 6 saptamani; puii trebuie sa fie obtinuti din oua provenind
de la efective libere de germeni specifici patogeni.
3. Se examineaza puii la interval de 24 de ore timp de 10 zile.
4. La fiecare examinare se atribuie fiecarui pui un coeficient:
0 = normal, 1 = bolnav, 2 = grav bolnav si 3 = mort.
5. Se inregistreaza rezultatele si se calculeaza indicele dupa exemplul
indicat mai jos:
______________________________________________________________________
Semne Zile dupa inoculare
clinice ________________________________________________________
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total scor
______________________________________________________________________
Normali 10 2 0 0 0 0 0 0 0 0 12 x 0 = 0
Bolnavi 0 4 2 0 0 0 0 0 0 0 6 x 1 = 6
Grav bolnavi 0 2 2 2 0 0 0 0 0 0 6 x 2 = 12
Morti 0 2 6 8 10 10 10 10 10 10 76 x 3 = 228
Total = 246
______________________________________________________________________
Indice = rezultatul mediu pe pasare si pe observatie = 246/100 = 2,46
______________________________________________________________________
Aceasta evaluare clinica este subiectiva, dar de obicei ea presupune ca
pasarile prezinta mai multe dintre simptomele urmatoare: tulburari
respiratorii, abatere, diaree, cianoza pielii sau a barbitelor, edemul fetei
si/sau al capului, tulburari nervoase.
CAP. 8
Evaluarea capacitatii de formare a plajelor
1. In general se prefera utilizarea unei game de dilutii ale virusului,
astfel incat sa se obtina un numar optim de plaje pe placa. Sunt suficiente 10
dilutii seriate in tampon fosfat salin, mergand pana la 10^-7.
2. In placi Petri de 5 cm diametru se prepara culturi celulare in monostrat
confluent: celule de embrioni de gaina sau o linie celulara corespunzatoare, de
exemplu: Madin-Darby, bovine kidney.
3. Se adauga cate 0,2 ml din fiecare dilutie de virus in cate doua placi
Petri si se lasa in repaus 30 de minute pentru absorbtia virusului.
4. Dupa ce au fost spalate de 3 ori in tampon fosfat salin celulele
infectate sunt acoperite cu un mediu corespunzator continand agar 1% g/v si
eventual 0,01 mg/ml tripsina. Este important sa nu se adauge deloc ser in
mediul de imersie.
5. Dupa o incubatie de 72 de ore la temperatura de 37 grade C plajele
trebuie sa fie de o marime suficienta. Pentru o mai buna observare se inlatura
stratul de agar si se coloreaza monostratul cu o solutie de cristal violet -
0,5% g/v in etanol solutie 25% g/v.
6. Toate virusurile trebuie sa formeze plaje clare atunci cand au fost
incubate intr-un mediu ce contine tripsina. In cazul in care mediile de
acoperire nu au continut tripsina, numai virusurile virulente pentru pui de
gaina vor forma plaje.
CAP. 9
Dubla imunodifuzie in gel de agar
Metoda preferata pentru demonstrarea prezentei virusului influentei A este
demonstrarea prezentei nucleocapsidei sau matricei antigenice pe care o detin
toate virusurile influentei A.
Aceasta se realizeaza in general prin teste de dubla imunodifuzie,
utilizandu-se preparate concentrate de virus sau extracte din membrane
corioalantoice infectate.
Prepararea concentratelor de virus se poate realiza prin simpla
centrifugare a lichidelor alantoice infectate si fragmentarea virusului pentru
obtinerea nucleocapsidei si matricei antigenice prin tratarea cu detergentul
lauril sodium sarcosinat. Precipitarea acida poate fi, de asemenea, utilizata
prin adaugarea de solutie de acid clorhidric 1 N la lichidul alantoic infectat
pana la un pH final de 3,5 - 4,0, urmata de refrigerare la temperatura de 0
grade C timp de o ora si apoi de centrifugare la 1.000 turatii/minut timp de 10
minute.
Supernatantul este inlaturat, iar precipitatul care contine virusul este
resuspendat intr-un volum minim de tampon glycil-sarkosyl - 1% tampon sodium
lauril sarcosinat la pH 9,0 cu 0,5 M glicina. Acest preparat contine atat
nucleocapsida, cat si matricea antigenica.
Beard - 1970 a descris prepararea antigenului imbogatit cu nucleocapsida
din membrane corioalantoice provenite de la oua infectate. Aceasta metoda
implica: recoltarea membranelor de la oua infectate cu hemaglutinare pozitiva,
omogenizarea lor, congelare-decongelare de 3 ori, urmata de centrifugare la
1.000 turatii/minut timp de 10 minute. Depozitul este inlaturat, iar
supernatantul este tratat cu 0,1% formalina si este utilizat ca antigen. Pentru
ambele antigene se poate utiliza fie testul de dubla imunodifuzie, utilizand
agaroza 1%, fie geluri continand 8% clorura de sodiu in tampon fosfat 0,1 M la
pH 7,2.
Prezenta virusului influentei aviare tip A este confirmata prin aparitia
liniilor de precipitare formate intre antigenul de testat, antigenul pozitiv
cunoscut si antiserul pozitiv cunoscut.
ANEXA 2
la norma sanitara veterinara
AUTORIZAREA
scoaterii oualor dintr-o exploatatie supusa conditiilor prevazute la art. 8
lit. e)
Autorizarea emisa de autoritatea competenta pentru transportul oualor
dintr-o exploatatie supusa conditiilor prevazute la art. 8 lit. e) catre o
intreprindere autorizata (unitate desemnata), pentru fabricarea si prelucrarea
produselor din oua, trebuie sa indeplineasca urmatoarele conditii:
1. pentru producerea de produse din oua pot fi folosite numai oua care nu
au fost incubate si care sunt bune pentru consum uman; coaja acestora trebuie
sa fie intreaga, fara fisuri;
2. ouale si produsele din oua care sunt improprii consumului uman trebuie
eliminate si denaturate astfel incat sa nu fie posibila refolosirea lor pentru
consum uman;
3. pentru a permite transportul dintr-o exploatatie suspecta ouale trebuie
sa fie ambalate si expediate direct de la aceasta spre unitatea desemnata;
fiecare transport trebuie sa fie sigilat inainte de expediere de catre medicul
veterinar oficial responsabil de exploatatia suspecta si sa ramana sigilat pe
tot parcursul transportului catre unitatea desemnata;
4. medicul veterinar oficial responsabil de exploatatia suspecta va informa
autoritatea competenta a unitatii desemnate despre intentia sa de a expedia
ouale catre aceasta;
5. autoritatea sanitara veterinara competenta, responsabila de unitatea
desemnata, se va asigura ca:
- ouale la care se face referire la pct. 1 trebuie sa fie izolate de
celelalte oua din momentul sosirii lor si pana la prelucrarea lor;
- cojile provenite de la aceste oua vor fi considerate ca material de risc
inalt si vor fi distruse;
- ambalajele, vehiculele utilizate pentru transportul oualor si toate
incintele care au venit in contact cu ouale vor fi curatate si dezinfectate
astfel incat sa fie distrus virusul influentei aviare;
- medicul veterinar oficial responsabil de exploatatia suspecta va fi
informat despre toate transporturile de oua prelucrate.
ANEXA 3
la norma sanitara veterinara
PROCEDURA
pentru curatarea si dezinfectia unei exploatatii infectate
1. Curatarea si dezinfectia primara
De indata ce carcasele de pasari domestice au fost transportate pentru a fi
distruse, acele parti ale incintelor in care au fost cazate pasarile si orice
parte a celorlalte cladiri, terenuri etc., contaminate in cursul sacrificarii
sau examenului post-mortem, vor fi aspersate cu dezinfectantele aprobate de
legislatia sanitara veterinara in vigoare.
a) Resturile de pasari sau de oua, care ar putea contamina cladirile,
terenurile, instrumentele etc., vor fi colectate si distruse impreuna cu
carcasele.
b) Dezinfectantul folosit trebuie sa ramana pe suprafetele mentionate la
lit. a) cel putin 24 de ore.
2. Curatarea si dezinfectia finala
a) Grasimea si murdaria vor fi indepartate de pe toate suprafetele prin
aplicarea unui agent de degresare si vor fi spalate cu apa.
b) Dupa spalare se va aplica dezinfectant.
c) Dupa 7 zile incintele vor fi tratate cu un agent degresant, clatite cu
apa rece, aspersate cu dezinfectant si spalate din nou cu apa.
d) Asternutul folosit si gunoiul de grajd trebuie sa fie prelucrate printr-o
metoda care permite distrugerea virusului. Aceasta metoda va cuprinde una
dintre urmatoarele practici:
- incinerarea sau tratamentul cu abur la o temperatura de 70 grade C;
- ingroparea la o adancime suficienta pentru a preveni accesul insectelor
si al pasarilor salbatice;
- depozitarea si umezirea (daca este necesar pentru a favoriza
fermentarea), acoperirea pentru a pastra caldura, astfel incat sa fie atinsa o
temperatura de 20 grade C, si mentinerea lor acoperite timp de 42 de zile pentru
a preveni accesul insectelor si al pasarilor salbatice.
ANEXA 4
la norma sanitara veterinara
LABORATORUL VETERINAR COMUNITAR DE REFERINTA
pentru influenta aviara
Denumirea laboratorului: Central Veterinary Laboratory
New Haw
UK-Weybridge
Surrey KT 15 3 NB
ANEXA 5
la norma sanitara veterinara
LISTA
cuprinzand laboratoarele internationale pentru diagnosticul influentei aviare
Belgia Institut National de Recherches Veterinaires Groeselenberg 99,
B-1180 Bruxelles
Danemarca National Veterinary Laboratory
Poultry Disease Division,
Hangovej 2,
DK-8200 Aarhus N.
Germania Bundesforschungsanstal fur Viruskrankheiten der Tiere
Anstaltsteil Riems (Fiedrich Loffler Institut), D-O-2201
Insel Riems
Franta Centre National d'Etudes Veterinaires et Alimentaires,
Laboratoire central de recherches agricoles et porcines,
BP 53,
F-22440 Ploufragan
Grecia Institute of Infections and Parasitological Diseases,
66, 26th October Street, 54627 Thessaloniki
Irlanda Veterinary Research Laboratory Abbotstown,
Castleknock, IRL - Dublin 15
Italia Istituto Zooprofilattico Sperimentale di Padova,
via G. Orus n. 2,
I-35100 Padova
Luxemburg Institut National de Recherches Veterinaires,
Groeselenberg 99,
B-1180 Bruxelles
Olanda Centraal Diergeneeskunding Institut Vestiging Virologie,
Houtribweg 39,
NL-8221 RA Lelystad
Portugalia Laboratorio Nacional de Investigacao Vetrinaria (LNIV),
Estrada de Benfica 701,
1500 Lisboa
Spania Laboratorio de Sanidad y Produccion Animal,
Zona Franca, Circunvalacion-Tramo 6,
Esquina Calle 3,
E-08004 Barcelona
Regatul Central Veterinary Laboratory,
Unit al New Haw, Weybridge
Marii GB-Surrey KT 15 3 NB
Britanii
si al
Irlandei
de Nord
Austria Bundesanstalt fur Virusseuchenbekampfung,
Wien-Hetzendorf
Finlanda Elainlaakinta ja elintarvikelaitos,
Helsinki/Anstalten for veterinarmedicin,
Och Livsmedel, Helsingfors
Suedia Statens veterinarmedicinska anstalt,
Uppsala.
ANEXA 6
la norma sanitara veterinara
CRITERII MINIME
pentru planul de contingenta
Planurile de contingenta trebuie sa indeplineasca cel putin urmatoarele
criterii:
1. constituirea unui centru de criza la nivel national, care sa coordoneze
toate masurile de control in Romania;
2. furnizarea unei liste cuprinzand centrele locale de control al bolii
care dispun de posibilitati adecvate pentru a coordona masurile de control al
bolii la nivel local;
3. furnizarea de informatii detaliate cu privire la personalul implicat in
aplicarea masurilor de control, calificarea si responsabilitatile lui;
4. fiecare centru local de control al bolii trebuie sa fie in masura sa
contacteze rapid persoanele sau organizatiile implicate direct sau indirect in
lichidarea focarului;
5. echipamentele si materialele sa fie disponibile pentru efectuarea
masurilor corespunzatoare de control al bolii;
6. furnizarea de informatii detaliate cu privire la masurile ce se vor lua
atunci cand infectia sau contaminarea este suspicionata sau confirmata,
inclusiv metodele propuse pentru distrugerea carcaselor;
7. instituirea programelor de pregatire pentru mentinerea si dezvoltarea
abilitatilor in domeniul procedurilor de teren si administrative;
8. laboratoarele de diagnostic trebuie sa aiba posibilitati pentru
examinarea post-mortem, capacitatile necesare pentru examenul serologic,
histologic etc. si trebuie sa fie capabile sa execute teste rapide de
diagnostic. Trebuie sa se intocmeasca planurile pentru transportul rapid al
probelor;
9. furnizarea de detalii cu privire la cantitatea de vaccin contra
influentei aviare, estimata ca fiind necesara in eventualitatea reinstituirii
vaccinarii de urgenta;
10. elaborarea de dispozitii pentru a asigura competentele legale necesare
pentru implementarea planurilor de contingenta.